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suixing1956

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助全基因合成

打算找公司合成一段1100个碱基的DNA序列，有启动子和终止子。想要在序列两端引入Bind HI和XhoI，该如何设计？是直接在序列两端引入酶切位点吗？恳请赐教！
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1楼2011-07-31 16:51:47
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cyzhgt

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gwbk at 2011-07-31 22:24:08:
2楼的牛人说的不错滴~我补充一下，嘿嘿
我在生工合成，3块钱1个碱基。合成完了才听说捷瑞2块7一个碱基，。
1，二楼说的很有道理，如果是pET载体表达的话，可以没有起始终止密码子，但是必须注意加酶切位点 ...

为什么我在生工合成基因要每对碱基3.8块呢？？难道我被坑了？？？求回复！！
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7楼2011-08-01 16:35:32
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cyzhgt

金虫 (小有名气)
哦  谢谢啊！！不过我合的不是很多，今年合过两次，都是一百多个碱基~~ 下次要跟他们讲价才行  哈哈！！
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10楼2011-08-01 23:19:38
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cyzhgt

金虫 (小有名气)
引用回帖:
1685272楼: Originally posted by yuguiyan at 2013-02-18 22:20:39
我的基因在NCBI上查到的只有CDS区我想连接表达载体转染进细胞，我要合成加上酶切位点的目的基因，我拿到的是什么形式呢？是像引物一样的干粉吗？我还需要连接T载体测序吗？还是直接连接表达载体就行了呢？...

一般是含有目的基因的克隆载体质粒和相应甘油菌。不需要测序，合成公司提供的合成报告里面有测序结果。质粒酶切后直接连接到表达载体上。（需要注意酶切位点）
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17楼2013-02-20 09:16:12
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