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luolh2004

金虫 (著名写手)

[求助] 细胞培养相关问题 急!!!!!

各位虫友们好啊,我现在进行Balb/c3T3细胞培养实验,现在遇到一系列麻烦事,特地向大家请教,谢谢了哦。
1.细胞培养使用的双抗溶液(购买的),有效期已经过了,还能够使用吗?因为没有注意到,我已经用了好长一段时间了。同样,如果类似R1640和DMEM培养基过期了,是不是就不能继续使用了?
2.近期发现细胞状态非常不好,有很多死细胞,不管是刚复苏的细胞还是已经复苏一段时间的细胞,死细胞都很多。细胞生长速度没受什么影响,算是比较正常,就是不知道为什么会有那么多死细胞,实在是找不出什么原因。
3.我目前正在做hegf表皮细胞生长因子活性检测实验,使用的方法是MTT法,细胞是Balb/c3T3细胞,但是每次做的实验结果都发现,加入生长因子样品和标准品的数值没有维持培养基的高。希望有同样做这个实验的虫友们,给点意见,或者是有机会大家多多交流下,谢谢了。
     MTT实验我已经做了大半年了,中间总是不断有问题出现,现在还是没有能完成,非常着急,有做过类似实验的虫友们,一定要帮帮我呀,非常感谢了!
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yangl6033

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

luolh2004(金币+5): 谢谢回帖交流 2011-07-26 08:06:25
本人感觉不管培养基过期不过期,最好是新鲜的,就是配制好再一两月之内用完,不然有可能pH变化,这对细胞的伤害是致命的,再说越是过期污染的几率越大。
空有凌云志恨无登天梯!-自寻梯子,哈哈!
7楼2011-07-25 20:59:13
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