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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wickhamhan(金币+3): 2011-07-20 21:28:20
西瓜(金币+5, EPI+1): Good! 2011-07-21 11:52:00
这个未必完全是酶的原因,你要看突变位点在什么地方:
(1)如果在引物内的某一位点发生突变则基本上是又有引物本身的问题,尤其是引物的最后一个碱基是A的时候,他之后的一个碱基发生突变的几率较其他3中碱基要大的多
(2)片段序列中含特殊序列:高GC或连续的多个串联重复序列在PCR扩增片段时以及连到载体并在受体菌内扩增时容易发生突变
(3)酶的保真性,不过你的片段只有600多,现在常用的普通Taq酶扩增一般的片段不会出现那么多突变,所以主要由前两个因素引起
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2楼2011-07-20 21:22:38
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