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HPLC 主峰保留时间 很不稳定
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同一仪器，同一柱子，流动相：0.25%四甲基氢氧化铵（调ph5.5）-乙腈-甲醇（900：60：40） 新柱子，刚开始四五天内出峰时间12.5min左右，几天之后时间变到22min、26min，很不稳定！不知道是怎么回事？求解 流动相对保留时间有多大的影响，像我用的这个流动相，应该怎么配才算是合格的！ |
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2楼2011-07-20 12:49:04
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4楼2011-07-20 13:50:31
【答案】应助回帖
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青枫林(金币+2): 谢谢回帖 2011-07-20 15:05:10
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-07-20 17:27:53
青枫林(金币+2): 谢谢回帖 2011-07-20 15:05:10
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-07-20 17:27:53
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流动相是个很重要的因素，包括比例、pH、梯度都会影响出峰时间， 夏天的话还可能是温度的问题，室温高于设定温度的话柱温箱是没有效果的（如果没有制冷能力）。 还有就是lz最好仔细查查使用的柱子的性质，是不是允许pH5.5的情况。 如果是等度洗脱，现配好就可以，有5%甲醇应该可以排除长菌，当然即使这样通常也是当天配置，隔夜的话最好使用之前过个膜，两三天之前的最好就别用了。 不知道你期间用的样品是不是同一个，如果是的话也可能是时间太久样品发生了变化。 |
5楼2011-07-20 14:26:50
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