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青枫林

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC 主峰保留时间 很不稳定

同一仪器,同一柱子,流动相:0.25%四甲基氢氧化铵(调ph5.5)-乙腈-甲醇(900:60:40)

新柱子,刚开始四五天内出峰时间12.5min左右,几天之后时间变到22min、26min,很不稳定!不知道是怎么回事?求解



流动相对保留时间有多大的影响,像我用的这个流动相,应该怎么配才算是合格的!
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zhgjsyzhyang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

青枫林(金币+2): 谢谢! 2011-07-20 15:23:10
可能是没混匀,尤其是用到四甲基氢氧化铵之类的,超声时间长一点吧。
9楼2011-07-20 15:19:07
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liulangtj

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


青枫林(金币+2): 谢谢回帖 2011-07-20 13:14:31
qinhy(金币+1): 谢谢应助回帖~ 2011-07-20 17:51:52
可能:1.流动相放久了,导致比例不一致,或者几天内重复使用初始配制的流动相,2.流动相配制错误,3.看看柱子压力前后几天的是否变化了,是不是保护不当堵了,4.ph没有调节对;等等
2楼2011-07-20 12:49:04
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青枫林

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by liulangtj at 2011-07-20 12:49:04:
可能:1.流动相放久了,导致比例不一致,或者几天内重复使用初始配制的流动相,2.流动相配制错误,3.看看柱子压力前后几天的是否变化了,是不是保护不当堵了,4.ph没有调节对;等等

1. 流动相都是当天配当天用。2.配的比例很注意了,而且重复很多次,不会有大问题!3.ph值调节也没问题  4.柱子前后几天的压力是变化了,保留时间长的压力大,保留时间短的压力小!
我现在就觉得是流动相混合时出的问题,但是又觉得混合不会产生这么大的变化?
3楼2011-07-20 13:14:10
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dingjinglvde

木虫 (正式写手)


westzilch(金币+1): 谢谢交流! 2011-07-20 15:46:48
色谱柱填料的是用范围是怎么样的?
PH值范围、有机相和水相比例范围
有机相比例太小,容易长菌,所以应该当天使用,否则柱压会变高
4楼2011-07-20 13:50:31
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