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PAOs

木虫 (小有名气)

[求助] DGGE之后的PCR P不出来了

大家好,我做全菌的DGGE后的PCR,用的50微升的体系:
968F:2微升
1392R:2微升
DNTP(mix):2微升
10*buffer:5微升
Mg离子:3微升
Taq酶:0.3微升

程序:94℃:5min
          94℃:30s
          55℃:30s
         72℃:30s
        72℃:10min

第一轮以溶解的DGGE胶中DNA为模板,1微升
http://good.gd/1388625.htm
http://good.gd/1388633.htm
第二轮以第一轮PCR产物为模板,1微升。
http://good.gd/1388636.htm

第一轮还好,有点条带,可第二轮不知道怎的整条泳道都是亮的。我不是很懂分子生物学,请大家支支招,万分感激。
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201014162

金虫 (正式写手)

楼主 我最近再做F968和R1401做引物的DGGE,一直分的不好,请问你的DGGE胶浓度和丙烯酰胺浓度多少?电泳时间多少?
生命在于奋斗
7楼2012-08-31 08:03:04
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