应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 測序結果不理想 求教版主
51/1返回列表
查看: 1412  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sirius8981

木虫 (正式写手)

[求助] 測序結果不理想 求教版主

我這個是COI基因，1460bp

先pcr，得到1460條帶

再用原先二個引物，加中間一個引物，sequence

因為學校只能測1000bp以內

每個結果大概700bp左右，隨後三個拼合。

我的問題是，每個結果的開頭70-80bp部分都會有干擾，有時很嚴重，NNNN，得不到序列。其他部分都很好。

我再測一次，還是同樣的結果，求助



[ Last edited by sirius8981 on 2011-7-9 at 19:38 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
[size=5]请迅雷快传不能下载的童鞋，让异地的朋友帮忙下载，多谢配合[/size]
1楼 2011-07-09 19:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good！ 2011-07-10 21:39:14
sirius8981(金币+8): 2011-07-16 09:49:53
3楼得解释是正确的，每个测序反应的前80bp结果都是不准确的，建议你在载体上找一条引物来测前面这80bp
赞一下(1人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-07-10 20:01:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-07-10 16:16:51
这个应该属于套峰情况，是你的东西不纯。。。
不知道你P出来之后有木有进行纯化呢？
另外楼主是在国外或者台湾吗？肿么都是繁体字？
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-07-09 20:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-07-10 16:17:02
西瓜(金币+3): 正解 2011-07-10 21:39:00
开始测定的几十个碱基是难测准的，信号差。
赞一下(2人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-07-10 05:02:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

啮风

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励一下 2011-07-11 07:45:38
sirius8981(金币+10): 2011-07-16 09:49:46
sirius8981(金币+10): 2011-07-16 09:51:07
引用回帖:
Originally posted by sirius8981 at 2011-07-09 19:37:00:
我這個是COI基因，1460bp

先pcr，得到1460條帶

再用原先二個引物，加中間一個引物，sequence

因為學校只能測1000bp以內

每個結果大概700bp左右，隨後三個拼合。

我的問題是，每個結果的開頭70-80b ...

楼主,用测序试剂盒自己测序确实很多时候出现这种苦恼,我建议你将你的目的条带连接到质粒上,用质粒的引物来扩增,目前使用的ABI测序仪,实际上是很难避免开始100BP内碱基的准确,或者可以说,即使你,得到的测序图谱,开始测序峰很单一,信号很强,结果也是不建议采用前50BP的.
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-07-10 22:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 19:22 by lXgU0RvNTDC9
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 19:10 by lXgU0RvNTDC9
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 7/350 2026-08-23 19:10 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 8/400 2026-08-23 18:58 by lXgU0RvNTDC9
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 18:55 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 18:46 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 4/200 2026-08-23 15:30 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 6/300 2026-08-23 14:21 by KM5EcsNQRBPn
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭