| 查看: 1374 | 回复: 3 | ||||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
蛋白过纤维素柱的过程
|
||||
| 请问，蛋白过纤维素柱怎么确定纤维素的用量？怎么做小试来确定梯度？玻璃柱过柱子之前怎么洗？越详细越好，新手不懂，感谢各位 |
回复此楼» 猜你喜欢
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有9人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有72人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有26人回复
-
我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人
已经有16人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有12人回复
-
招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师
已经有3人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有23人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有7人回复
-
filecode
已经有12人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有13人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 多糖酶解 HPLC 去酶
已经有13人回复
- 关于多糖的提取和纯化
已经有13人回复
- β-糖苷酶表达可溶性蛋白很多，怎么就是没有活性
已经有24人回复
- 羧甲基纤维素和DEAE纤维素分离蛋白有什么区别？
已经有4人回复
- 【求助/交流】如何高度纯化蛋白，急急急
已经有15人回复
- 【求助】如何选择手性分析柱
已经有4人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
2026年财务管理、经济与信息技术国际会议 (FMEIT 2026)
+1/668
-
上海同城
+1/118
-
中国科学院空天院精密干涉测量团队 精密机械结构工程师招聘启事
+1/83
-
中国科学院空天院精密干涉测量团队 精密机械结构工程师招聘启事
+1/82
-
北京信息科技大学机电工程学院硕士研究生招生线上宣讲会——8月16日
+1/81
-
东南大学杰青/海优团队招聘催化方向博士后
+1/81
-
中国科学院空天院精密干涉测量团队招聘光学/算法/机械方向博士后/特别研究助理
+1/80
-
中国科学院空天院精密干涉测量团队招聘光学/算法/机械方向博士后/特别研究助理/工程师
+1/79
-
华南理工大学招2027年生物材料、药物递送申请考核制博士生
+1/27
-
物理学报录用，散币感谢合作者和审稿人
+2/24
-
希望这篇论文能中
+2/12
-
论文祈福
+1/9
-
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/8
-
关于Ghaffar-Parkins催化剂催化氰基水解为酰胺的问题
+1/6
-
中国科学院生态环境研究中心环境工程相关方向招收保送硕士和联合培养博士和硕士研究生
+1/4
-
UTS 招收2027年入学博士生
+1/3
-
中国科学技术大学环境学院招聘招生
+1/2
-
海南大学化学院—功能分子器件团队2027博士招生+博士后招聘
+1/2
-
中科院理化所热声热机团队招聘电气工程专业(电机方向)博士后/特别研究助理
+1/1
-
KFUPM Turki Baroud组招全奖博士/博后｜下一代膜材料・水凝胶・清洁水
+1/1
3楼2011-07-08 11:33:48
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19796.7
- 帖子: 6619
- 在线: 2793.7小时
- 虫号: 856414
2楼2011-07-08 02:07:09
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19796.7
- 帖子: 6619
- 在线: 2793.7小时
- 虫号: 856414
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+6, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-08 20:07:43
暖木warm(金币+3): 非常感谢 2011-07-08 21:57:34
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+6, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-08 20:07:43
暖木warm(金币+3): 非常感谢 2011-07-08 21:57:34
|
如果是填料，说明书可能是没有了。我这里有DEAE的说明书，我也用过这个层析柱。 空柱是要洗干净才行的，至于装柱，最好还是有连接器，不然装不实，如果有空隙效果就会差一点了。你说的玻璃柱也不一定要玻璃柱，你用其它材质的也行，如果是玻璃，用氢氧化钠洗的时候会有轻微的反应生成硅酸钠，所以材质最好选择能耐受高pH值的。 DEAE短时间内能耐受pH1-14，但要注意是短时间，最多冲洗2个柱床体积就要改变回去，最好是中性的。工作时候pH2-9，但考虑到蛋白质过酸过碱会变性，所以最好是5-8，具体是多少还要看你的蛋白质而定，最好是看看各个pH值下你的蛋白质的半寿期。 填料的用量我觉得还是首先要看看你有多少填料，填料足够了，你装多大都行。至于摸索条件之类的，你就装小的，5毫升就行，甚至1毫升也可以，这样就能很快冲洗完一个柱床体积了。因为一倍柱床体积是不足以冲洗完全的，所以每做一个浓度都应该冲洗多于一倍，我用5倍，柱床体积越小就越节省时间。 至于摸索完洗脱条件之后，就要用来分离制备样品，这时候用柱床体积大的，有利于结合较多的蛋白质，一次制备较多的蛋白质。你可以装个20毫升的，随你了。 自己装的层析柱如果接头合适，那也能用蛋白质纯化仪的，那就不用装小柱，直接装大柱了，洗脱条件也不用摸索了，直接走0-100%氯化钠连续线性梯度。 |
4楼2011-07-08 19:06:41
