| 查看: 1201 | 回复: 3 | ||||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
蛋白过纤维素柱的过程
|
||||
| 请问，蛋白过纤维素柱怎么确定纤维素的用量？怎么做小试来确定梯度？玻璃柱过柱子之前怎么洗？越详细越好，新手不懂，感谢各位 |
回复此楼» 猜你喜欢
0703化学求调剂
已经有17人回复
-
考研调剂-材料类-284
已经有15人回复
-
一志愿211 0703化学 346分求调剂
已经有3人回复
-
材料工程085601，270求调剂
已经有24人回复
-
085404 293求调剂
已经有3人回复
-
调剂
已经有21人回复
-
复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分
已经有15人回复
-
08工科求调剂290分
已经有12人回复
-
286求调剂
已经有16人回复
-
材料类284调剂
已经有24人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 多糖酶解 HPLC 去酶
已经有13人回复
- 关于多糖的提取和纯化
已经有13人回复
- β-糖苷酶表达可溶性蛋白很多，怎么就是没有活性
已经有24人回复
- 羧甲基纤维素和DEAE纤维素分离蛋白有什么区别？
已经有4人回复
- 【求助/交流】如何高度纯化蛋白，急急急
已经有15人回复
- 【求助】如何选择手性分析柱
已经有4人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
湖北大学 矿物及固废资源化利用环境能源新材料研究团队 材料与化工 调剂招生
+2/448
-
攀枝花学院大量招收调剂：材料科学与工程(学硕：0805)和材料工程（专硕：0856）。
+1/187
-
西安电子科技大学通信工程学院招收 “非全日制 调剂生“
+2/94
-
东北石油大学化学化工学院还有少量调剂名额（化学、化学工程与技术、化学工程专硕）
+1/91
-
哈尔滨工程大学核动力装置研究所招收1-2名博士生
+1/88
-
大湾区大学李红庚与中国科学技术大学王柳教授联合招收博士后
+1/41
-
喀什大学环境生态修复功能材料与技术团队接收2026年调剂研究生
+1/38
-
河南中部某本科高校 资源与环境（专硕）研究生 招生信息
+1/37
-
长江师范学院化学化工学院化学工程方向接收大量调剂考生
+1/11
-
【博士招生】武汉科技大学招收材料、化工、环境、冶金类2026年“申请-考核”制博士生
+1/11
-
2026年西华大学材料学院-材料近净成形与表面技术研究团队-招收调剂研究生
+1/10
-
Postdoc position in continuum mechanics of brain tissue at KTH in Stockholm
+1/9
-
★上海★上海工程技术大学·环境与资源创新中心（ICER）接收化工材料环境等学科调剂生
+1/8
-
齐齐哈尔大学李莉课题组诚招2026级考研调剂生（学硕和专硕）
+1/6
-
大连工业大学“轻工技术与工程”石海强教授课题组招收硕士研究生
+1/4
-
湖南大学白玉罡课题组招收2026年入学博士生（第二批补录）
+1/4
-
2026年北京服装学院- 纺织化学与染整工程-刘老师可招收化学相关专业考研调剂
+1/4
-
0854,0858调剂招生
+1/3
-
哈尔滨医科大学李老师课题组招收生物信息学方向博士、硕士研究生
+1/2
-
一志愿211电子信息347求调剂
+1/1
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19506.4
- 帖子: 6591
- 在线: 2780.6小时
- 虫号: 856414
2楼2011-07-08 02:07:09
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19506.4
- 帖子: 6591
- 在线: 2780.6小时
- 虫号: 856414
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+6, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-08 20:07:43
暖木warm(金币+3): 非常感谢 2011-07-08 21:57:34
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+6, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-08 20:07:43
暖木warm(金币+3): 非常感谢 2011-07-08 21:57:34
|
如果是填料，说明书可能是没有了。我这里有DEAE的说明书，我也用过这个层析柱。 空柱是要洗干净才行的，至于装柱，最好还是有连接器，不然装不实，如果有空隙效果就会差一点了。你说的玻璃柱也不一定要玻璃柱，你用其它材质的也行，如果是玻璃，用氢氧化钠洗的时候会有轻微的反应生成硅酸钠，所以材质最好选择能耐受高pH值的。 DEAE短时间内能耐受pH1-14，但要注意是短时间，最多冲洗2个柱床体积就要改变回去，最好是中性的。工作时候pH2-9，但考虑到蛋白质过酸过碱会变性，所以最好是5-8，具体是多少还要看你的蛋白质而定，最好是看看各个pH值下你的蛋白质的半寿期。 填料的用量我觉得还是首先要看看你有多少填料，填料足够了，你装多大都行。至于摸索条件之类的，你就装小的，5毫升就行，甚至1毫升也可以，这样就能很快冲洗完一个柱床体积了。因为一倍柱床体积是不足以冲洗完全的，所以每做一个浓度都应该冲洗多于一倍，我用5倍，柱床体积越小就越节省时间。 至于摸索完洗脱条件之后，就要用来分离制备样品，这时候用柱床体积大的，有利于结合较多的蛋白质，一次制备较多的蛋白质。你可以装个20毫升的，随你了。 自己装的层析柱如果接头合适，那也能用蛋白质纯化仪的，那就不用装小柱，直接装大柱了，洗脱条件也不用摸索了，直接走0-100%氯化钠连续线性梯度。 |
4楼2011-07-08 19:06:41
