应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白过纤维素柱的过程
31/1返回列表
查看: 1172  |  回复: 3
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

暖木warm

金虫 (正式写手)

[交流] 蛋白过纤维素柱的过程

请问，蛋白过纤维素柱怎么确定纤维素的用量？怎么做小试来确定梯度？玻璃柱过柱子之前怎么洗？越详细越好，新手不懂，感谢各位
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-07-07 20:16:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
暖木warm(金币+1): 恩，是的。求解答，谢谢 2011-07-08 08:47:57
DEAE纤维素阴离子柱？

自装的？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-07-08 02:07:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+6, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-08 20:07:43
暖木warm(金币+3): 非常感谢 2011-07-08 21:57:34
如果是填料，说明书可能是没有了。我这里有DEAE的说明书，我也用过这个层析柱。

空柱是要洗干净才行的，至于装柱，最好还是有连接器，不然装不实，如果有空隙效果就会差一点了。你说的玻璃柱也不一定要玻璃柱，你用其它材质的也行，如果是玻璃，用氢氧化钠洗的时候会有轻微的反应生成硅酸钠，所以材质最好选择能耐受高pH值的。

DEAE短时间内能耐受pH1-14，但要注意是短时间，最多冲洗2个柱床体积就要改变回去，最好是中性的。工作时候pH2-9，但考虑到蛋白质过酸过碱会变性，所以最好是5-8，具体是多少还要看你的蛋白质而定，最好是看看各个pH值下你的蛋白质的半寿期。

填料的用量我觉得还是首先要看看你有多少填料，填料足够了，你装多大都行。至于摸索条件之类的，你就装小的，5毫升就行，甚至1毫升也可以，这样就能很快冲洗完一个柱床体积了。因为一倍柱床体积是不足以冲洗完全的，所以每做一个浓度都应该冲洗多于一倍，我用5倍，柱床体积越小就越节省时间。

至于摸索完洗脱条件之后，就要用来分离制备样品，这时候用柱床体积大的，有利于结合较多的蛋白质，一次制备较多的蛋白质。你可以装个20毫升的，随你了。

自己装的层析柱如果接头合适，那也能用蛋白质纯化仪的，那就不用装小柱，直接装大柱了，洗脱条件也不用摸索了，直接走0-100%氯化钠连续线性梯度。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-07-08 19:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 暖木warm 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程321分求调剂 +11 大米饭！ 2026-03-15 14/700 2026-03-17 17:11 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 材料工程专硕调剂 +4 204818@lcx 2026-03-17 4/200 2026-03-17 16:58 by ruiyingmiao
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +6 SUICHILD 2026-03-12 6/300 2026-03-17 09:24 by 雾散后相遇lc
[考研] 301求调剂 +3 A_JiXing 2026-03-16 3/150 2026-03-17 08:21 by 无际的草原
[考研] 一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 311求调剂 +5 26研0 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:21 by a不易
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭