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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 亲们~谁做过酿酒酵母的转化，怎么筛选阳性克隆呢？
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牵着猎人的狼

银虫 (小有名气)

[求助] 亲们~谁做过酿酒酵母的转化，怎么筛选阳性克隆呢？

最近第一次做酵母的表达，不知道该用什么培养基了来筛选阳性克隆，YNB和ypd有什么区别呢？YNB里面含有硫酸铵和不含的有区别么？
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___戊_

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1楼 2011-06-29 14:57:15
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ottolzm

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励应助 2011-06-29 18:07:36
牵着猎人的狼(金币+1): 2011-07-04 00:41:44
买试剂盒吧 Fast（TM）YEAST transformation 化学转化试剂盒 一盒5000多 转化效率杠杠的好 (50次装) 或者用电转 不要去做原生质体转化 很麻烦 而且效率也就那样
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3楼2011-06-29 16:57:33
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zyly605

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 新虫交流，鼓励下 2011-06-29 16:39:02
牵着猎人的狼(金币+1): 2011-07-04 00:41:39
应该有筛选标记吧，比如抗性基因，我们一般都是用KanMX抗性，也就是在YEPD中添加G418来筛选的
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2楼2011-06-29 15:19:43
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牵着猎人的狼

银虫 (小有名气)
我的筛选标记是营养缺陷，-his。试剂盒包括感受态么？
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4楼2011-06-29 23:02:36
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ottolzm

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 牵着猎人的狼 at 2011-06-29 23:02:36:
我的筛选标记是营养缺陷，-his。试剂盒包括感受态么？

试剂盒里只配有试剂  感受态需要用这个制作  现作现用 操作就和大肠一样简单 转化效率很高 可以试试
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5楼2011-07-04 08:43:16
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