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heiguzi1988

新虫 (初入文坛)

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虫号: 889460
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专业: 动物遗传学

[求助] 请教一下RACE技术

我已知这个基因的CDNA片段长只有700多，预测基因全长CDNA是1万的样子。可以以这700为基础，通过3'和5'race得到这全长的序列然后测通吗？

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1楼 2011-06-26 10:48:17

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ivxy

金虫 (正式写手)

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专业: 水产生物免疫学与病害控制

【答案】应助回帖

★
lstt09nk(金币+1): 鼓励 2011-07-21 09:52:26

如果这么长，建议用简并引物扩部分长，
并且5‘RACE建议用特意引物逆转录。

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4楼2011-07-20 22:22:40

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匿名

用户注销 (初入文坛)

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★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-07-21 09:52:07

本帖仅楼主可见

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2楼2011-07-18 14:50:03

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第五平原

木虫 (正式写手)

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性别: GG
专业: 蔬菜学与瓜果学

【答案】应助回帖

你的目标基因太长了，够呛啊。

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勤勉

3楼2011-07-20 22:11:39

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thinka

铜虫 (著名写手)

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专业: 老年医学

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢交流 2011-07-21 09:52:40

其实也是有可能的,通过在3' 或者5' UTR上设计引物，我用invitrogen 试剂盒克隆得到过不下十个超过4K的包含全长ORF序列的3' 或者5'序列。如果你的片断在中间部位的话还是有可能的，不过难度非常大，最好是尝试拿到两个分别靠近3'和5'的片段，然后分别做RACE，然后设计全长引物克隆

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5楼2011-07-20 23:53:09

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