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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教一下RACE技术
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heiguzi1988

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教一下RACE技术

我已知这个基因的CDNA片段长只有700多，预测基因全长CDNA是1万的样子。可以以这700为基础，通过3'和5'race得到这全长的序列然后测通吗？
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1楼 2011-06-26 10:48:17
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匿名

用户注销 (初入文坛)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-07-21 09:52:07
本帖仅楼主可见
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2楼2011-07-18 14:50:03
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

第五平原

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的目标基因太长了，够呛啊。
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勤勉
3楼2011-07-20 22:11:39
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ivxy

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
lstt09nk(金币+1): 鼓励 2011-07-21 09:52:26
如果这么长，建议用简并引物扩部分长，
并且5‘RACE建议用特意引物逆转录。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-07-20 22:22:40
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thinka

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢交流 2011-07-21 09:52:40
其实也是有可能的,通过在3' 或者5' UTR上设计引物，我用invitrogen 试剂盒克隆得到过不下十个超过4K的包含全长ORF序列的3' 或者5'序列。如果你的片断在中间部位的话还是有可能的，不过难度非常大，最好是尝试拿到两个分别靠近3'和5'的片段，然后分别做RACE，然后设计全长引物克隆
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5楼2011-07-20 23:53:09
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qwertY23

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

长度是够长的，做出来的可能性还是有的，看用什么盒子也是关键。我们实验室就做race的，有不会的，长时间做不出来的 ，可以交流下。帮忙做也可以的
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实验代做，技术服务，race，DGGE，wb，QPCR.流式及免疫组化
6楼2011-11-29 16:57:23
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聂子3388

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by qwertY23 at 2011-11-29 16:57:23:
长度是够长的，做出来的可能性还是有的，看用什么盒子也是关键。我们实验室就做race的，有不会的，长时间做不出来的 ，可以交流下。帮忙做也可以的

你好，我现在也想做这块了，但是第一次尝试，很所技术要点没掌握。我想扩的基因具有保守序列，很多其他物种都扩出来了，现在如果我利用保守序列设计引物扩出部分基因的话，怎样设计RACE引物去得到基因全长呢 谢谢啊
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7楼2012-02-15 09:12:28
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