| 查看: 3236 | 回复: 8 | |||
[交流]
蛋白切胶回收 做质谱
|
|
本人有一PEG修饰蛋白，修饰后分子量在90kD左右，想通过MALDI-TOF测定分子量。问题是蛋白纯度不高，想通过PAGE胶回收的方法获得高纯度的蛋白。搜索了论坛有关蛋白胶回收的帖子，收益匪浅，但仍有问题请教大家： 1. 关于电泳 变性还是非变性：我的用途是测定分子量，跑电泳可以是SDS-PAGE吗？SDS会污染样品导致分子量测定结果吗？最保险的方法是native-PAGE？ 2.关于电泳后的蛋白洗脱：论坛上给出了两种方法，一是将胶切碎或研碎，置于溶液中，冰箱过夜，离心得上清再透析浓缩；二是电洗脱，置于透析袋中水平电泳。第一种方法比较简单，但是我担心研碎的过程会不会导致胶成分小部分溶解，从而导致上清中成分复杂，影响质谱测定？在这点上说是不是电洗脱方法会好一点呢？ 请虫友们帮忙分析分析，先行谢过啦！ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有7人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有11人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有10人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有7人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有12人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有7人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 奇怪 切胶回收后扩增后目的产物跟 加收时的目的条带不一样
已经有9人回复
- SDS-PAGE胶蛋白微量回收试剂盒(说明书)-BSP062
已经有19人回复
- 关于切胶回收后有质粒污染和拼接PCR涂抹装条带的问题，有点长，呵呵
已经有13人回复
- 求助！切胶回收蛋白的方法
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于蛋白质质谱鉴定的疑问
已经有5人回复
- 【求助/交流】求解答：纯化后的蛋白跑胶有杂带
已经有4人回复
- 【求助/交流】从蛋白胶里回收蛋白
已经有16人回复
- 【求助/交流】PCR产物切胶回收后可不可以加A尾,做TA克隆，急！希望高手们能帮帮忙！
已经有9人回复
- 【求助/交流】从SDS-PAGE凝胶中回收蛋白条带用哪个试剂盒好？
已经有11人回复
2楼2011-06-23 10:08:59
★
20100136(金币+1):谢谢参与
20100136(金币+1):谢谢参与
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2011-06-23 11:23:25
4楼2011-06-23 12:20:04
|
本帖内容被屏蔽 |
5楼2011-06-23 12:31:54
6楼2011-06-23 14:49:01
7楼2011-06-23 16:29:59
8楼2013-08-10 09:56:51
9楼2013-08-18 10:08:04
投票:
30