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求助:如何确定是否有移码突变
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yxybaby
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专业: 细胞、亚细胞结构与功能
[
求助
]
求助:如何确定是否有移码突变
我构建了一个pet32a的原核载体,插入片段1000bp,是一段cDNA序列,有atg的。双酶切xho1和bamh1,双酶切已经鉴定成功并将菌液送测序,用的载体t7引物,测序结果与原序列比对一致,但不知在载体中是否有移码突变?要做原核表达。请大家帮忙解答。
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2011-06-14 16:07:48
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pc1453
金虫
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专业: 生物物理、生物化学与分子
你的问题解决了吗,我现在也是这个类似问题,可以教我一下吗
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7楼
2019-01-24 17:10:22
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wuzuobin125
铜虫
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注册: 2008-03-20
专业: 系统生物学
顶贴,跟进,学习
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2楼
2011-06-14 16:36:18
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lxj341401
至尊木虫
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专业: 生物化学
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amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-06-14 18:57:30
yxybaby(金币+5): 谢谢,这就去看 2011-06-14 20:03:51
pet32a是融合表达的,只要BamHI酶切位点前面,XhoI在后面,而且你的序列中BamHI酶切位点后没有多余碱基或者是多余碱基3的倍数就没有移码突变。
简单的,去看看图谱就知道了。
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3楼
2011-06-14 18:04:59
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zgb1982
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注册: 2008-11-29
专业: 植物病理学
顶,一同学习,其实我不太明白,表达载体里没有内含子的吗,是不是从载体的第一位开始全部都要翻译出氨基酸呢
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4楼
2011-06-14 21:32:37
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