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有谁用过纯化糖蛋白的conA sepharose 4B琼脂糖凝胶柱的进！
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最近从文献中看到conA sepharose 4B可以用来纯化糖蛋白，所以就想试试。 这是整个的过程 1、 装柱。 2、 平衡。 3、 吸附。 4、 清洗。 5、 洗脱。 平衡与洗脱的缓冲液用的相同的为20mmol/LTris-HCl缓冲液，pH7.4，其中含1mM MnCl2，1mM CaCl2，0.15M NaCl。但是很奇怪为什么我的蛋白过柱之后（中间我还让样品留在柱中反应了2小时）就立刻跟随杂蛋白一起被洗脱出来，不知道是什么情况。是不是我的平衡液出了什么问题，望解答！ |
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