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[求助]
化合物分离纯化的问题
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由于本课题组无人做微生物次生代谢产物方面的实验，所以特向诸位大侠求助： 1、第一个实验是关于分代谢产物的，我现在发酵了104L，得到乙酸乙酯粗提物 仅13克，其中含有少量的氯化钠，由于样品太少，而且自己对这块也是新手， 准备按实验指导书上，进行硅胶柱分离，走传统方法。目标是把该菌株产生的 次生代谢产物尽可能多的都分离到，得到结构。 问题在于： 1）实验室目前实验设备不足，仅有三根柱子，导师让我看看缺什么，再买。。。我没有经验，希望各位 支支招？ 2）和其他学校以同学讨论，她说，样品少的话，可以先上大孔树脂分段，然后液相看出峰条件，再用制备型液相收集样品，这样损失较少。不知道是否可行？ 2、另一个实验是我固态发酵做的，粗品得到的也很少，是比较两中发酵方法的化合物产生情况不同，我想问问，如果不分单体的话，有没有好的办法能够说明化合物变化啊。 耐心看完，各位辛苦了，谢谢各位了！ |
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13g应该不算少的，呵呵 不知道lz里面大概有多少个组分？以前做十几个发酵产物组分的时候有用过大孔树脂分段，梯度洗脱就能分段了，HPLC可以检测分段效果，然后在过硅胶柱粗分，要是组分多而且极性相近的话建议lz你买细的硅胶，耗时一点没关系， 如果不需要分离单体的话HPLC不是就可以看出相对变化么？或者你做个标准曲线神马的也可以看绝对的啊，要是有条件做个LC-MS就更好了呢！我看别人探索发酵条件一般就用HPLC就够了呢。。。 |
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