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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 化合物分离纯化的问题
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m2hy

金虫 (正式写手)

[求助] 化合物分离纯化的问题

由于本课题组无人做微生物次生代谢产物方面的实验，所以特向诸位大侠求助：
1、第一个实验是关于分代谢产物的，我现在发酵了104L，得到乙酸乙酯粗提物  
   仅13克，其中含有少量的氯化钠，由于样品太少，而且自己对这块也是新手，
   准备按实验指导书上，进行硅胶柱分离，走传统方法。目标是把该菌株产生的 次生代谢产物尽可能多的都分离到，得到结构。
问题在于：
1）实验室目前实验设备不足，仅有三根柱子，导师让我看看缺什么，再买。。。我没有经验，希望各位 支支招？
2）和其他学校以同学讨论，她说，样品少的话，可以先上大孔树脂分段，然后液相看出峰条件，再用制备型液相收集样品，这样损失较少。不知道是否可行？

2、另一个实验是我固态发酵做的，粗品得到的也很少，是比较两中发酵方法的化合物产生情况不同，我想问问，如果不分单体的话，有没有好的办法能够说明化合物变化啊。
耐心看完，各位辛苦了，谢谢各位了！
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人生能有几回搏？此时不搏待何夕？
1楼 2012-02-23 19:44:58
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不二兔兔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 陆云传奇 at 2012-09-21 09:01:34
我做的方向和你的一样
也是先发酵菌  然后做提取分离
不过我们的技术已经成熟
可以交流

能跟我交流下不

发自小木虫IOS客户端
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9楼2015-12-25 16:45:14
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查看全部 10 个回答

sky10016

木虫 (著名写手)

xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-24 13:01:47
无论如何，如果有HPLC的话，先把得到的粗物质分析一下。
你发酵的是真菌吧，其实粗物质的量不算少了。别人有发酵得到几g的。你的13g不少了。
我没有用过大孔树脂分过段，不过薄层层析柱色谱（短而且粗的硅胶柱）倒是很少的方法。
砍完段后，再用HPLC分析，能制备就直接制备，不能制备的在作进一步的分离。
楼主，核磁解析结构（平面和立体）是重点。
祝你好运。
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m2hy
方寸间，历数世上桑田沧海；时空里，细问人间暑往寒来；是朋友，星移斗转情不改；是知音，天涯海角记心怀。
2楼2012-02-24 09:49:58
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m2hy

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by sky10016 at 2012-02-24 09:49:58:
无论如何，如果有HPLC的话，先把得到的粗物质分析一下。
你发酵的是真菌吧，其实粗物质的量不算少了。别人有发酵得到几g的。你的13g不少了。
我没有用过大孔树脂分过段，不过薄层层析柱色谱（短而且粗的硅胶柱） ...

谢谢你哦，我发酵的不是真菌，是粘细菌，由于实验室技术资源很少，没有人带，我们其他组有同学得到28克粗品，分的单体克数太少，都打不出谱，我有点怕。。。
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人生能有几回搏？此时不搏待何夕？
3楼2012-02-24 12:35:21
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热爱生命的猪

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-24 13:01:54
m2hy(金币+5): ★★★很有帮助 谢谢交流！ 2012-02-24 18:26:23
13g应该不算少的，呵呵
不知道lz里面大概有多少个组分？以前做十几个发酵产物组分的时候有用过大孔树脂分段，梯度洗脱就能分段了，HPLC可以检测分段效果，然后在过硅胶柱粗分，要是组分多而且极性相近的话建议lz你买细的硅胶，耗时一点没关系，

如果不需要分离单体的话HPLC不是就可以看出相对变化么？或者你做个标准曲线神马的也可以看绝对的啊，要是有条件做个LC-MS就更好了呢！我看别人探索发酵条件一般就用HPLC就够了呢。。。
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做个工作狂，，，哈哈
4楼2012-02-24 12:51:23
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