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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物医学基础 » [求助]明胶的纯化方法及过程
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wenzi9888

木虫 (正式写手)

[求助] [求助]明胶的纯化方法及过程

虫子我学材料的，买了瓶化学纯的明胶，实验时发现纯度不够，好像又没有分析纯的试剂购买，因此在这求助怎么把化学纯的明胶进一步提纯以及要注意些什么问题，请给出详细点的步骤，谢谢！

方法最好简单可行！

[ Last edited by wenzi9888 on 2012-3-9 at 10:19 ]
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1楼 2012-03-09 10:17:13
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

iceinwater

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-03-10 11:58:55
引用回帖:
3楼: Originally posted by wenzi9888 at 2012-03-09 11:36:37:
我觉得是有很多杂质，使得明胶不稳定。所以我只想把它尽可能的再纯化一下，请问，我该怎么做

明胶的性质稳定与否也是与你的应用方式和目的相关联的，在一定范围内，质量等级较高的明胶还是具有稳定性的。某些市售的国产明胶可能本身就不是为了科研而生产的，所以纯度不是很高，且批次之间的差异会比较明显。如果你的实验要求比较高，还是买好点的吧，比如sigma的。
简单的纯化方法楼上都说了，楼主根据自己的需要进行选择。
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9楼2012-03-09 17:17:18
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普通回帖

iceinwater

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wenzi9888(金币+10): ★有帮助 2012-03-09 16:21:02
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-03-09 16:51:57
明胶本来就是一种混合物，就像合成高分子一样，它的分子量是呈一定范围内的分布状态的，所以基本上很难做到真正的纯化。
如果楼主的意思是明胶中含有非明胶成分的其他杂质的话，那可能还可以根据需要进行一些纯化操作。但是想彻底做到分析纯的级别，估计很有难度。而且在纯化过程中会伴随明胶性质的变化。
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2楼2012-03-09 10:51:18
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wenzi9888

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by iceinwater at 2012-03-09 10:51:18:
明胶本来就是一种混合物，就像合成高分子一样，它的分子量是呈一定范围内的分布状态的，所以基本上很难做到真正的纯化。
如果楼主的意思是明胶中含有非明胶成分的其他杂质的话，那可能还可以根据需要进行一些纯化 ...

我觉得是有很多杂质，使得明胶不稳定。所以我只想把它尽可能的再纯化一下，请问，我该怎么做
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3楼2012-03-09 11:36:37
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biomater

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wenzi9888(金币+10): ★有帮助 2012-03-09 16:21:17
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-03-09 16:52:33
明胶是混合物，若想纯化，是指出去非蛋白类的物质，还是将分子量限定于某个范围内？
不太清楚你用的是什么明胶，想除去什么？
不过蛋白纯化的用盐析就好了，或者过滤。。这两个应该简单些
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焚琴煮鹤岂不快哉。。。。。。
4楼2012-03-09 13:15:42
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wenzi9888

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by biomater at 2012-03-09 13:15:42:
明胶是混合物，若想纯化，是指出去非蛋白类的物质，还是将分子量限定于某个范围内？
不太清楚你用的是什么明胶，想除去什么？
不过蛋白纯化的用盐析就好了，或者过滤。。这两个应该简单些

请教具体该怎么操作，对于这个我还真不懂！
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5楼2012-03-09 13:34:47
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hellokittyto
6楼2012-03-09 13:41:00
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biomater

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-03-09 16:52:17
wenzi9888(金币+30): ★★★很有帮助 2012-03-10 22:11:05
除掉低分子量的蛋白直接透析，
根据你要确定蛋白的分子量，选择合适透析带就好了。。。2k，3.5k，8k，10k，12k。。。100-100000分子量的透析袋均有。  
透析就好了，不断换水，透掉低分子量的。  
最后冻干就好了。

若是有高分子量的杂质，盐析就比较重要
盐析要查文献，
看看要到添加到多少浓度的才能使的蛋白沉淀下来。（可以使杂质沉淀，也可以是目标蛋白）
离心取沉淀，或者清夜。
再透析。
冻干。。。

盐析在除掉杂蛋白中效果比较明显，严重推荐。。。
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焚琴煮鹤岂不快哉。。。。。。
7楼2012-03-09 16:50:32
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biomater

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-03-10 11:58:48
引用回帖:
5楼: Originally posted by wenzi9888 at 2012-03-09 13:34:47:
请教具体该怎么操作，对于这个我还真不懂！

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1310018
想系统学习可以看看这个帖子。。

若是急欲得到实验方案，看看别人的文章蛋白是怎么得到的。。。
若有详细的盐析数据就可以参考啦。。。

真没有直接过透析效果有点差，可以考虑超滤。。主要是分子量啊。。。没分子量我也不好给你建议啊。。。
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焚琴煮鹤岂不快哉。。。。。。
8楼2012-03-09 17:07:43
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biomater

银虫 (著名写手)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-03-12 19:19:33
引用回帖:
9楼: Originally posted by iceinwater at 2012-03-09 17:17:18:
明胶的性质稳定与否也是与你的应用方式和目的相关联的，在一定范围内，质量等级较高的明胶还是具有稳定性的。某些市售的国产明胶可能本身就不是为了科研而生产的，所以纯度不是很高，且批次之间的差异会比较明显 ...

正在做相关项目？有机会探讨下。。。
对市售明胶接触的相对较少，都是自己做的一些。
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焚琴煮鹤岂不快哉。。。。。。
10楼2012-03-12 08:42:31
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