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475502411

铜虫 (著名写手)

[求助] 电转化的问题

pGEM-T Easy的重组质粒,大约是3.7KB,能不能通过电专转化到任意临床分离菌中(大肠杆菌),谢谢各位大侠指教!!!!!
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可以朝九晚五,也能浪迹天涯
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wuzuobin125

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by 啮风 at 2011-06-10 21:34:55:
这个肯定不行的,因为野生菌株里面的限制内切酶系统,很容易切掉外来DNA的,所以一般克隆或者表达用的大肠杆菌,都是人工修饰过的。

质粒点击转化这种方法还是可行的,不过这位童鞋说的是对的,不经人为筛选过的野生菌株确有去掉外源DNA的酶切系统。
7楼2011-06-11 11:54:50
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen


1949stone(金币+1): 鼓励 2011-06-10 11:14:23
这个当然可以的。。。
只要你把大肠杆菌的感受态细胞做好,细胞效率高就没有什么问题。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-06-10 09:31:25
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wzwhq

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


1949stone(金币+1): 鼓励 2011-06-10 11:14:33
475502411(金币+1): 2011-06-12 19:17:07
大肠杆菌是阴性菌,细胞壁薄,用热激法转化就行,当然电转化效率会更高的
3楼2011-06-10 10:59:27
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫

肯定可以的,找个大肠杆菌感受态制作方法。
仕不可不弘毅,任重而道远
4楼2011-06-10 17:41:04
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