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sunmoods

金虫 (小有名气)

[求助] 底泥DNA提取

用的方法是5g土样 DNA提取液、蛋白酶、溶菌酶、SDS、酚氯仿异戊醇、氯仿异戊醇、异丙醇沉淀。最后产物很多,不可能全是DNA,电泳效果也不好 ,拖尾严重。帮忙分析下原因,有什么改进方法
下面是电泳图,MARK没跑好。。。
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yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-06-08 10:15:51
sunmoods(金币+10): 2011-06-08 13:02:15
如果连Marker都没跑好的话,那就是胶没做好,电压、电流没控制好。
1g琼脂糖 2ml 50*TAE  98ml双蒸水 煮沸3次,电压控制在100V, 电流在90-100mA
2楼2011-06-08 09:34:53
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yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2, EPI+1): 非常热心 2011-06-08 10:16:05
另外给你一篇关于DNA提取的文献,实验室师姐用的就是文献中的方法提取的土壤DNA的,本人有时也用它提取芽孢杆菌的DNA,效果很不错,跑出来的条带很清晰,不比CTAB法差,就是时间上有点长,工作量不大,但需要花两天的时间。
3楼2011-06-08 10:06:06
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sunmoods

金虫 (小有名气)

谢谢2位的回复,MARK估计是没完全融化就吸了 ,以前没问题的。
现在就是泳道的杂质很多,几乎全部染色了。有什么办法消除
4楼2011-06-08 10:21:51
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bear0329

金虫 (正式写手)

学习了
以马内利!
5楼2011-06-08 15:47:58
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