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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 底泥DNA提取
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sunmoods

金虫 (小有名气)

[求助] 底泥DNA提取

用的方法是5g土样 DNA提取液、蛋白酶、溶菌酶、SDS、酚氯仿异戊醇、氯仿异戊醇、异丙醇沉淀。最后产物很多，不可能全是DNA，电泳效果也不好 ，拖尾严重。帮忙分析下原因，有什么改进方法
下面是电泳图，MARK没跑好。。。
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1楼 2011-06-08 09:15:04
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yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-06-08 10:15:51
sunmoods(金币+10): 2011-06-08 13:02:15
如果连Marker都没跑好的话，那就是胶没做好，电压、电流没控制好。
1g琼脂糖 2ml 50*TAE  98ml双蒸水 煮沸3次，电压控制在100V, 电流在90-100mA
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2楼2011-06-08 09:34:53
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yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2, EPI+1): 非常热心 2011-06-08 10:16:05
另外给你一篇关于DNA提取的文献，实验室师姐用的就是文献中的方法提取的土壤DNA的，本人有时也用它提取芽孢杆菌的DNA，效果很不错，跑出来的条带很清晰，不比CTAB法差，就是时间上有点长，工作量不大，但需要花两天的时间。
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3楼2011-06-08 10:06:06
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sunmoods

金虫 (小有名气)
谢谢2位的回复，MARK估计是没完全融化就吸了 ，以前没问题的。
现在就是泳道的杂质很多，几乎全部染色了。有什么办法消除
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4楼2011-06-08 10:21:51
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bear0329

金虫 (正式写手)
学习了
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以马内利！
5楼2011-06-08 15:47:58
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