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Lee_Py

银虫 (小有名气)

[求助] 想问下在以cDNA为模板时,PCR的结果却是徒步 什么原因

用内标P的结果就很好 说明不是CDNA的问题  但是为啥用自己的引物却P那么差 P的根marker一样
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churchill87426

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-02 20:42:43
Lee_Py(金币+3): 2011-06-04 15:49:46
LZ 的目的条带多长啊?其实内标很好并不能说明cDNA好啊,我这段时间做的用国产试剂盒反转录就能出actin但是目的条带不出(目的条带2100bp),后来换个进口反转录试剂盒,一次目的条带就出了,当然actin也出。 不知道LZ最后P出来目的条带没啊?
另外引物特异性问题,LZ可以用NCBI上blast一下,看看非特异性扩增多不多,如果不行就试一下改改引物。
6楼2011-06-02 18:40:16
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