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xdrlll

新虫 (初入文坛)

[求助] issr条带不清楚

我是初做issr，用的体系是dNTP 0.7微，引物0.7微，Mg1.8微，dna2微，TAQ0.4微 ，buffer2.5微的反应体系，94预变性3分,94变性30秒，48退火45秒，72延伸90秒35个循环72延伸10分。是每个引物都要重新选退火温度吗是Tm-5吗？
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1楼 2011-05-29 21:30:50
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809737810

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-05-30 12:53:50
DNA浓度最好是10ug/ul；
Tm梯度筛选；
循环40；
琼脂糖浓度与质量
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3楼2011-05-29 22:01:32
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
issr不懂……
帮顶下
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2楼2011-05-29 21:57:37
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dazey

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-05-30 18:53:13
针对不同的材料，不同的引物的退火温度是需要梯度筛选的
最好优化下体系，正交优化
琼脂糖凝胶用2%的
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4楼2011-05-30 17:05:20
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