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◆细胞菜鸟问个养细胞的基础问题◆
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正在自己拿着说明书养PC12细胞 1.细胞在培养皿中所占的面积约70% 2.加台盼蓝计数后，进行传代，要求细胞的推荐播种浓度为1.5×10的5次方/ml 说道细胞的个数，怎么会用体积单位，怎么算的。然后在培养皿中所占面积又是怎么计算的？ 菜鸟求大侠帮组啊，给金币! [ Last edited by cddryw on 2011-5-26 at 18:01 ] |
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2楼2011-05-27 15:20:36
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3楼2011-05-27 16:07:39
【答案】应助回帖
cddryw(金币+10): 非常详细，就喜欢这样的回答，谢谢. 2011-05-30 21:39:16
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其实说明书说的和实际中操作还是有很大的差别的，当然按照说明书操作最好~~~ 楼上说的其实也很明白了，对于初学者，我在具体说一下： ①细胞占培养皿（其实最好用培养瓶，污染的几率相对小一些）面积的70%就是细胞生长到对数生长期时期的状态，当然一般都是目测，80%也没有关系，但是最好不要等到细胞长满整个底部再去消化传代，那时候就有些晚了~~~ ②细胞计数：最简单的就是用细胞计数板，至于加台盼蓝染色，我们平时操作都没有，还有就是传代的时候根本不计数，但是还介绍一下细胞计数的方法，以后在做相关细胞试验需要细胞计数的时候也可用得上：首先消化离心后，弃去离心管内的培养基，加入定量的培养基，吹散细胞，然后取一滴滴于细胞计数板一侧的边缘边缘处，然后在显微镜下观察透过盖玻片下的那四个象限的细胞数，取均数，用以下公式算得每mL的细胞悬液里面细胞的个数：均数×10（4次方），即为每mL里面细胞所含个数。 如果之前没有养过细胞，最重要的就是如何防止污染，还有就是边冻存，边做实验。 祝好运~~~  |
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