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jinglilv

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jinglilv

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4楼2011-05-23 08:47:40
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

这个貌似不是这样吧。。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-05-22 21:42:30
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

jinglilv(金币+2): 逻辑清晰,通俗易懂。 2011-05-23 08:48:26
引用回帖:
Originally posted by jinglilv at 2011-05-22 20:42:44:
我有两份样品,其中一份样品中某一基因缺陷(只有一份拷贝),而另一份样品正常(即该基因有两份拷贝),在酶和引物都相同的情况下,是否最终获得的PCR产物的量前者为后者的一半呢?

这个要看你的循环数,如果循环数太大,PCR反应到了平台期,反应体系中的某些成分已经耗尽(酶、dNTP、引物等),那么产物的量就达到了最大值,不能再增加,这时你起始模板量尽管不同,但是产物的量是一样的。
下面是网上随便找的一个荧光定量PCR的图,横坐标是循环数,纵坐标是荧光值(既DNA的量)。你看底下标的cell的数目。尽管起始模板量差了那么多,但这几条线最终都到了同样的高度(即产物量一样)。但是在平台期之前,是可以看出差异的。比如在22个循环时,红色线和蓝色线的纵坐标值就差好多。跑胶是可以从亮度上看出区别的。

回到你的问题,模板量相差两倍,但产物量差异是随着循环数变化的哦(未必是两倍),两个PCR都到了平台期后,产物量达到反应体系能支撑的最大值,那时就是一样的啦。

3楼2011-05-22 22:54:53
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