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lihongyeer

金虫 (正式写手)

[求助] DNA测序求助

想通过16s rDNA来对微生物进行鉴定,但测序公司回复说:“您的样品(10株)的1492R向    的测序结果出现了重叠峰,测序失败,这有可能是您的模板存在污染,或是由于引物与模板的结合性不单一,导致扩增过程中有大小相近的非特异性条带杂片段产生,而琼脂糖回收无法分离这样的片段所致,建议您改进实验条件重新提供样品”
菌株我是通过四轮分离纯化的,应该不会全部污染,引物我用的是通用引物1492r和27f,DNA提取使用的天根生化的细菌基因组DNA提取试剂盒,请问各位有经验的虫友,现在该怎么做?
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Strivetomakeeverydayjoyfulandmeaningful!
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带刀猎人

新虫 (小有名气)

自己做16s成本要这么高么?
我自己做了40株菌的16s, 测序费用大概2千,加上试剂费用也不过3千,但是仪器折旧费不算哈
11楼2011-05-19 08:52:25
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带刀猎人

新虫 (小有名气)

我没做克隆菌落PCR后直接送样
13楼2011-05-19 21:57:41
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