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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
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qiang7

金虫 (小有名气)

[求助] Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助

求助各位高手指点，本人最近蛋白电泳过程中经常出现在蛋白样品刚跑离样品孔还没进入分离胶的时候，样品就漏下来了！如下图所示。在我想的问题都找遍了，比如浓缩胶浓缩时间，玻璃板清洗问题及玻璃板都换新的了，还有试剂都换了一套，还是漏 真不知道还有什么致命因素没有找到，请各位大侠指点！小弟将不胜感激！
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1楼2011-05-18 10:33:22
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qiang7

金虫 (小有名气)
但我都放了不止30min啦 TEMED加的夜不多啊5%的浓缩胶5ml加5μl多么？
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4楼2011-05-18 11:04:13
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qiang7

金虫 (小有名气)
类似图片
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2楼2011-05-18 10:34:23
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xuguanghai

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
qiang7(金币+1): 浓缩胶都浓缩了近1h了 还有没有什么关键因素啊？ 2011-05-18 11:11:22
adslye(金币+1): 鼓励交流~祝顺利！ 2011-09-26 09:11:13
会不会是分离胶中的聚丙酰胺没有聚合，蛋白没有孔径进入分离胶，一般30分钟左右分离胶都能聚合，TEMED的量不能太多，只是起加速聚合作用，多的话会使胶变硬，变脆，胶容易裂开，蛋白肯定就跑不进孔径里了。觉得可能还是胶那里出了问题。

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3楼2011-05-18 10:47:56
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qiang7

金虫 (小有名气)
希望大家继续提建议，问题仍没有得到解决
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5楼2011-05-21 10:21:56
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