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shenmofeng新虫 (初入文坛)
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摇瓶发酵菌丝结团
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黑曲霉摇瓶发酵产柠檬酸，培养基成分为木薯液化液加硫酸铵，种子液接种，30℃200rpm培养，菌丝结团如图，目测直径1mm以上了，最后产酸低，残糖高，发酵异常。 文献中记载柠檬酸高产菌的特征是形成小菌丝球（小于0.1mm）而不是结成这么大的球,请问造成这样的原因是什么呢？谢谢！   |
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【答案】应助回帖
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shenmofeng(金币+15): 多谢 2011-05-11 10:16:51
rainwander(金币+3, EPI+1): 解答的很详细~ 2011-05-12 07:35:36
shenmofeng(金币+15): 多谢 2011-05-11 10:16:51
rainwander(金币+3, EPI+1): 解答的很详细~ 2011-05-12 07:35:36
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装液量看样子应该是三角瓶容积的五分之一左右，也就是说如果用的是500毫升的瓶子，你的装液量就是100毫升。这个装液量在200rpm的转速下培养基的转动情况是非常剧烈的，如果接种量比较大，菌丝球的大小也会比较小，从你的图片上看，大小没有异常。装液量不是原因。 黑曲霉在30度下培养是没有问题的，温度不是原因。 培养液的颜色跟我的有点不同，你的颜色发红，我的木薯液化醪不是这个颜色，除非是你的黑曲霉产生色素。或者你的木薯没有去皮就粉碎做成这个，很多木薯的皮是红色的。 你的三角瓶瓶壁上黑曲霉的孢子不多，如果正常，液化醪中的某些比较小的固形物在摇动的过程中会沾一点在瓶壁上，培养基能达到多高就沾在多高的地方，然后黑曲霉会在上面生长，产孢子。从孢子的数量来看，你的培养时间至少是已经3天了，就是不知道别人做这个实验的时候用多久的培养时间。或许你可以做一个柠檬酸的产生曲线，因为别人的时间不一定适合你的菌。 液化醪中会有一点儿渣，菌丝会以渣为中心发展出去的，可能会造成菌丝球偏大。想到这里，我记得似乎你发帖说过液化醪要不要离心的，看样子你似乎没有离心好，或者是根本没有离心。 |
8楼2011-05-11 01:41:13
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【答案】应助回帖
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1、 你是这么小的摇瓶发酵，如果要做什么培养基优化，我觉得最好还是用孢子接种。 2、 你的木薯没有去皮，皮是渣，没有营养的，最好自己刮掉。木薯也要按照工厂的要求来粉碎，要过多少目的筛子就照过。生产酒精的时候是过20目筛子的，不知道你这个要过多少目。原料粉碎之后渣会碎很多。 3、 你的液化醪是自己制作的吗？液化率能不能保证每次都一致？ 4、 培养温度用30度不知道是否合适，也可能会有些影响的，我见有人优化过温度，也有人能没有用30度，他们都是用黑曲霉，不知道对于你的菌株你用的30度是不是最好的。 5、 摇床的转速也是，有人用300rpm的，你的200rpm不知道是不是经过优化过的。 6、 提高接种量确实是能够提高菌丝球数量和减小菌丝球尺寸的，因为在摇动的过程中菌丝球的生长也会受到影响，太密集了就长不开了。由于在摇动，菌丝球到一定大小之后不会纠缠在一起了。 7、 摇瓶发酵的时候瓶壁上的那一圈是不可避免的，不用在意这个问题。 8、 至于工厂里是不是离心，我觉得如果发酵罐太大，离心还是麻烦了些，但是去皮不麻烦。具体就要问问工厂里怎么做了，这个可能导师了解。 9、 菌丝球肯定是会形成的，凡是摇瓶培养，这个转速和这个装液量下应该都会形成，但是成菌丝球不一定是造成发酵异常的原因。 10、 你以前有没有做过黑曲霉产柠檬酸，感觉似乎经验少了些。附件放上一篇黑曲霉用木薯液化醪发酵产柠檬酸的国内文章，就是不知道是不是适合你。 |
14楼2011-05-12 00:06:21
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【答案】应助回帖
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rainwander(金币+5): 鼓励交流 2011-05-12 07:36:19
rainwander(EPI+1): 2011-05-12 07:36:23
rainwander(金币+5): 鼓励交流 2011-05-12 07:36:19
rainwander(EPI+1): 2011-05-12 07:36:23
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这个是正式回复帖，因为上一张不能上传附件。 1、 你是这么小的摇瓶发酵，如果要做什么培养基优化，我觉得最好还是用孢子接种。 2、 你的木薯没有去皮，皮是渣，没有营养的，最好自己刮掉。木薯也要按照工厂的要求来粉碎，要过多少目的筛子就照过。生产酒精的时候是过20目筛子的，不知道你这个要过多少目。原料粉碎之后渣会碎很多。 3、 你的液化醪是自己制作的吗？液化率能不能保证每次都一致？ 4、 培养温度用30度不知道是否合适，也可能会有些影响的，我见有人优化过温度，也有人能没有用30度，他们都是用黑曲霉，不知道对于你的菌株你用的30度是不是最好的。 5、 摇床的转速也是，有人用300rpm的，你的200rpm不知道是不是经过优化过的。 6、 提高接种量确实是能够提高菌丝球数量和减小菌丝球尺寸的，因为在摇动的过程中菌丝球的生长也会受到影响，太密集了就长不开了。由于在摇动，菌丝球到一定大小之后不会纠缠在一起了。 7、 摇瓶发酵的时候瓶壁上的那一圈是不可避免的，不用在意这个问题。 8、 至于工厂里是不是离心，我觉得如果发酵罐太大，离心还是麻烦了些，但是去皮不麻烦。具体就要问问工厂里怎么做了，这个可能导师了解。 9、 菌丝球肯定是会形成的，凡是摇瓶培养，这个转速和这个装液量下应该都会形成，但是成菌丝球不一定是造成发酵异常的原因。 10、 你以前有没有做过黑曲霉产柠檬酸，感觉似乎经验少了些。附件放上一篇黑曲霉用木薯液化醪发酵产柠檬酸的国内文章，就是不知道是不是适合你。 |
15楼2011-05-12 00:09:02
