24小时热门版块排行榜    

查看: 2790  |  回复: 11
本帖产生 3 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tutufei

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】大家来看下我的RNA电泳图

我想做反转录,然后扩增目的条带,不知道RNA提得可以吗?第一个泳道不知道为什么跟其他的不一样?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wolfebst(EPI+1): 回答不错 2011-04-18 14:36:44
tutufei(金币+5): 谢谢你的建议! 2011-04-23 00:04:47
引用回帖:
Originally posted by tutufei at 2011-04-18 13:17:02:
提的就是细菌的total RNA,没办法,实验室没做过RNA,所以条件不好,这个电泳没加变性剂

其实提取RNA的条件没那么苛刻,在普通的通风橱里就可以操作,外源RNase的污染比较好消除,关键是破壁时的内源降解。如果用trizol法就必须考虑trizol的量。

另外,相同的方法提取不同细菌的RNA效果也不一样。比如霍乱用trizol法提取效果极差,而沙门菌提取效果就较好;所以霍乱菌最好是用试剂盒过柱子提取,然后浓缩。我提取的是大肠杆菌,摸索了好几种方法,最后确定也是qiagen 的kit提取,然后浓缩。

另外,有一种可以喷的液体,叫做RNase抑制剂,用于消除表面RNase的污染,在客观条件不是很好的时候很有效。

最后祝lz实验顺利,好运啊!
5楼2011-04-18 14:25:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wolfebst(金币+1): 鼓励多多交流 2011-04-18 08:11:57
引用回帖:
Originally posted by tutufei at 2011-04-17 22:32:22:
我想做反转录,然后扩增目的条带,不知道RNA提得可以吗?第一个泳道不知道为什么跟其他的不一样?

不知lz提取的是什么东东的RNA?

我提过细菌的total RNA。从lz的电泳图来看,质量不好。RIN值太低,表明降解严重。
2楼2011-04-18 06:48:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
rainwander(金币+1, EPI+1): 相应管理员号召,开始加大EPI给予力度~ 2011-04-18 13:22:07


提取的大肠杆菌total RNA,可以用来做转录组分析的。大条带应该是小条带亮度的两倍最好,最差也得亮度差不多,对应的数量差不多。

祝lz实验顺利!

[ Last edited by zhaohq1209 on 2011-4-18 at 09:31 ]
3楼2011-04-18 09:30:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tutufei

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by zhaohq1209 at 2011-04-18 06:48:11:
不知lz提取的是什么东东的RNA?

我提过细菌的total RNA。从lz的电泳图来看,质量不好。RIN值太低,表明降解严重。

提的就是细菌的total RNA,没办法,实验室没做过RNA,所以条件不好,这个电泳没加变性剂
4楼2011-04-18 13:17:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +11 晴天加油 2026-08-26 12/600 2026-08-28 01:22 by li09465290@
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 XLGfUIdOmEAO 2026-08-27 4/200 2026-08-27 22:26 by 3RAFyYXYSwGS
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金不中,共勉 +10 eulota 2026-08-26 10/500 2026-08-27 17:23 by lqllinqiaoli
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
信息提示
请填处理意见