24小时热门版块排行榜    

查看: 2336  |  回复: 11
本帖产生 3 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tutufei

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】大家来看下我的RNA电泳图

我想做反转录,然后扩增目的条带,不知道RNA提得可以吗?第一个泳道不知道为什么跟其他的不一样?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tutufei

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by zhaohq1209 at 2011-04-18 06:48:11:
不知lz提取的是什么东东的RNA?

我提过细菌的total RNA。从lz的电泳图来看,质量不好。RIN值太低,表明降解严重。

提的就是细菌的total RNA,没办法,实验室没做过RNA,所以条件不好,这个电泳没加变性剂
4楼2011-04-18 13:17:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wolfebst(金币+1): 鼓励多多交流 2011-04-18 08:11:57
引用回帖:
Originally posted by tutufei at 2011-04-17 22:32:22:
我想做反转录,然后扩增目的条带,不知道RNA提得可以吗?第一个泳道不知道为什么跟其他的不一样?

不知lz提取的是什么东东的RNA?

我提过细菌的total RNA。从lz的电泳图来看,质量不好。RIN值太低,表明降解严重。
2楼2011-04-18 06:48:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
rainwander(金币+1, EPI+1): 相应管理员号召,开始加大EPI给予力度~ 2011-04-18 13:22:07


提取的大肠杆菌total RNA,可以用来做转录组分析的。大条带应该是小条带亮度的两倍最好,最差也得亮度差不多,对应的数量差不多。

祝lz实验顺利!

[ Last edited by zhaohq1209 on 2011-4-18 at 09:31 ]
3楼2011-04-18 09:30:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wolfebst(EPI+1): 回答不错 2011-04-18 14:36:44
tutufei(金币+5): 谢谢你的建议! 2011-04-23 00:04:47
引用回帖:
Originally posted by tutufei at 2011-04-18 13:17:02:
提的就是细菌的total RNA,没办法,实验室没做过RNA,所以条件不好,这个电泳没加变性剂

其实提取RNA的条件没那么苛刻,在普通的通风橱里就可以操作,外源RNase的污染比较好消除,关键是破壁时的内源降解。如果用trizol法就必须考虑trizol的量。

另外,相同的方法提取不同细菌的RNA效果也不一样。比如霍乱用trizol法提取效果极差,而沙门菌提取效果就较好;所以霍乱菌最好是用试剂盒过柱子提取,然后浓缩。我提取的是大肠杆菌,摸索了好几种方法,最后确定也是qiagen 的kit提取,然后浓缩。

另外,有一种可以喷的液体,叫做RNase抑制剂,用于消除表面RNase的污染,在客观条件不是很好的时候很有效。

最后祝lz实验顺利,好运啊!
5楼2011-04-18 14:25:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +7 YXCT 2026-03-01 8/400 2026-03-02 10:37 by YXCT
[考研] 材料学硕318求调剂 +6 February_Feb 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:36 by 聪明的大松鼠
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:16 by 13853210211
[考研] 282求调剂 +3 2103240126 2026-03-02 4/200 2026-03-02 09:25 by 汪!?!
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 8/400 2026-03-01 22:50 by jian_
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见