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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】醋酸菌
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xiaoyaoZMY

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】醋酸菌已有14人参与

我现在要做醋酸菌的发酵试验，寻找理想的生产果醋的发酵条件。我现在正在将冷冻保藏的醋酸菌进行活化，是在斜面培养基上培养的，我想尽量缩短试验的时间，不知道这一步活化是不是也有扩培的作用，做完这一步能不能直接将活化完的菌种接种在三角烧瓶中的增殖培养基中进行摇床振荡培养，使醋酸菌产酸，并在这一过程中测量一系列指标，用单因素试验确定出影响因素的水平，然后再转入发酵罐中进行正交试验找出理想的发酵条件。
希望师兄师姐和各位前辈们给我些指点吧！
谢谢了！
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在理想与现实中游走
1楼2011-04-16 22:09:13
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xiaoyaoZMY

木虫 (正式写手)
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Originally posted by 郝钊 at 2011-04-16 22:18:44:
你从冷冻状态将菌株转接到斜面上，已经是活化菌种了。不过你要接种到三角瓶，用接种环？接种量会有较大的差别，不如液体培养后接种菌液，比较均一。你的思路是正确的，一般都是先做单因子试验，摸索好了条件再上罐。

非常感谢能收到回复！你的意思是进行两次三角烧瓶扩培效果比较好是吧，先用接种环接种到一级增殖培养基中摇床，然后再把这次扩培出的菌株用移液管接种到二级增殖培养基中再摇床。我也想把试验做的好一些，但是就是不知道时间是否够用，所以想缩短一下时间。我还想问一下，一般扩培的培养时间是不是应该比活化的时间要长呢？再次谢谢了！
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在理想与现实中游走
3楼2011-04-17 00:18:45
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xiaoyaoZMY

木虫 (正式写手)
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Originally posted by liuyuetq at 2011-04-17 09:30:31:
我在做氨基酸的发酵试验，感觉流程和你的有些相似。
我是这么做的 优化斜面培养基就是活化的培养基，然后优化种子培养基种子摇瓶用最后是发酵培养基和发酵条件的控制。
我看你的实验是不是现在在优化种子培养基 ...

但是有一个问题，醋酸菌发酵后的菌液可以测OD值吗？
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在理想与现实中游走
6楼2011-04-18 23:13:37
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xiaoyaoZMY

木虫 (正式写手)
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Originally posted by liuyuetq at 2011-04-19 07:55:38:
为什么不可以呢，我做氨基酸发酵时是以取发酵液0.5ml与双蒸水9.5ml，稀释100倍，用分光光度计在600nm下测其OD。难道LZ是考虑发酵液的颜色太深而对实验有影响么

恩，我就是顾虑到这一点
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在理想与现实中游走
9楼2011-04-19 08:56:50
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xiaoyaoZMY

木虫 (正式写手)
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Originally posted by liuyuetq at 2011-04-19 07:55:38:
为什么不可以呢，我做氨基酸发酵时是以取发酵液0.5ml与双蒸水9.5ml，稀释100倍，用分光光度计在600nm下测其OD。难道LZ是考虑发酵液的颜色太深而对实验有影响么

还有一个问题，接种量如何控制，因为要做好几组试验，随着时间的不同，菌体的数量肯定会增加或减少，培养液中的菌体密度会不一样，就算每次取用的菌液体积一样，接种量也会不一样。难道要每次接种前测一下OD值吗？
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在理想与现实中游走
11楼2011-04-19 09:04:59
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xiaoyaoZMY

木虫 (正式写手)
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Originally posted by liuyuetq at 2011-04-19 09:08:09:
好几组实验，是平行实验么？好几组实验的目的是要优化培养基还是选取最佳接种量？

不是平行试验，时间来不及了。好几组试验是要探讨不同的因素对醋酸菌发酵产酸的影响，接种量我想作为一个不变的因素，并不是要选取最佳接种量。比如说，保持接种量一样的情况下分别设置不同的温度进行发酵，看哪个温度发酵产酸最多。
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在理想与现实中游走
13楼2011-04-19 13:01:26
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xiaoyaoZMY

木虫 (正式写手)
我在配制醋酸菌的液体增殖培养基的时候用的电热套加热溶解酵母膏、葡萄糖这些培养基的成分，一开始没杀菌没接种的时候还是透明的澄清的，但是当加完无水乙醇接种的时候突然发现三角瓶中有沉淀物，这是怎么回事？难道酵母膏也要像琼脂一样要煮沸吗？
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在理想与现实中游走
14楼2011-04-19 13:16:18
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xiaoyaoZMY

木虫 (正式写手)
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1247059楼: Originally posted by ZHZDZWZH at 2012-02-18 21:29:07
楼主你好！我现在有和您一样的问题："我现在要做醋酸菌的发酵试验，寻找理想的生产果醋的发酵条件。我现在正在将冷冻保藏的醋酸菌进行活化，是在斜面培养基上培养的，我想尽量缩短试验的时间，不知道这一步活化 ...

不好意思，好久不上了，现在我已经不做这方面的试验了，至于思路什么的已经好久不想了，建议还是去请教一下其他专业人士吧，实在不好意思了！
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在理想与现实中游走
22楼2012-09-20 16:59:42
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xiaoyaoZMY

木虫 (正式写手)
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1272971楼: Originally posted by zhoujlhn at 2012-08-07 15:50:58
我也有个纠结的问题，用OD测发酵液生物量的时候，对照液用培养基还是蒸馏水啊?非常急啊！！！！

不好意思，刚刚看到你的帖子，我个人认为是用培养基做对照，因为现在已经不做这方面了，建议还是请教一下高人或者自己多查查文献，不好意思了！
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在理想与现实中游走
23楼2012-09-20 17:01:21
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