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woaipan

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 60.7
帖子: 26
在线: 13小时
虫号: 894791

[交流] 【求助】急！有木有做过Tricine－SDS－PAGE小分子蛋白电泳的进！

我最近在纯化蛋白，估计纯化得到的蛋白分子量挺小的，低于10kD，想用tricine－sds-page电泳跑一下看看，但是查了资料这种电泳需配置阴极和阳极两种电泳缓冲液，我照着说明配好了，现在不知道如何使用，具体怎么加到电泳槽中。以前做sds-page的时候只需要加一种电泳缓冲液，所以糊涂了。
注：文献中说是阳极电泳液加到底部，阴极的则加在上部。
亟待各位大虾的帮助和解决！

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1楼 2011-04-16 15:42:11

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苏州生健

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 5.5
帖子: 2
在线: 24分钟
虫号: 2828978

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

13楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-09-24 15:06:46
二楼的方法我也用过，可以很好的分离4kD的小蛋白。其实10kD的蛋白不一定用tricine胶。可以自己做个12-21%的梯度胶，或者胶里加加6M尿素。至于什么阳极阴极缓冲液，你只要把阴极缓冲液加在上槽（和胶的样品孔相连）， ...

请问12%-21%的梯度胶怎么配，还有6M尿素在凝胶中的具体作用是什么？谢谢