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【求助】急!有木有做过Tricine-SDS-PAGE小分子蛋白电泳的进!
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woaipan
铜虫
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(幼儿园)
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虫号: 894791
[交流]
【求助】急!有木有做过Tricine-SDS-PAGE小分子蛋白电泳的进!
我最近在纯化蛋白,估计纯化得到的蛋白分子量挺小的,低于10kD,想用tricine-sds-page电泳跑一下看看,但是查了资料这种电泳需配置阴极和阳极两种电泳缓冲液,我照着说明配好了,现在不知道如何使用,具体怎么加到电泳槽中。以前做sds-page的时候只需要加一种电泳缓冲液,所以糊涂了。
注:文献中说是阳极电泳液加到底部,阴极的则加在上部。
亟待各位大虾的帮助和解决!
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2011-04-16 15:42:11
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cicelyzh
铁杆木虫
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虫号: 1614001
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
二楼的方法我也用过,可以很好的分离4kD的小蛋白。其实10kD的蛋白不一定用tricine胶。可以自己做个12-21%的梯度胶,或者胶里加加6M尿素。至于什么阳极阴极缓冲液,你只要把阴极缓冲液加在上槽(和胶的样品孔相连),阳极缓冲液加在下槽即可。
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13楼
2012-09-24 15:06:46
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woaipan
铜虫
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(幼儿园)
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在线: 13小时
虫号: 894791
,自己先顶一个,怎么木有人啊~,救命啊
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2楼
2011-04-16 15:49:16
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mamadexiao
木虫
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虫号: 576831
woaipan(金币+1): 2011-04-18 15:50:58
我觉得是不是那种中型胶板阿,上下各自装缓冲液的那种
另外,用TRICINE配的胶似乎也可以在一般的缓冲液里跑啊...
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3楼
2011-04-16 18:13:37
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woaipan
铜虫
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(幼儿园)
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虫号: 894791
貌似如果用一般的缓冲液电泳系统还是连续的,tricine好像就是不连续的电泳体系,所以好像必须得用阴阳极的缓冲液!
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4楼
2011-04-16 19:12:58
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