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lijunj

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌转化PCR鉴定,没有阳性菌落已有5人参与

最近再做克隆,用菌液PCR做的筛选,对照组有明显的目的条带,而实验组一个没有。大家说,我有必要提几个质粒做酶切吗
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我是一只小小的鸟儿,希望通过自己早起,有份吃的
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
西瓜(金币+3): 鼓励 2011-04-16 14:47:37
引用回帖:
Originally posted by lijunj at 2011-04-15 22:50:17:
最近再做克隆,用菌液PCR做的筛选,对照组有明显的目的条带,而实验组一个没有。大家说,我有必要提几个质粒做酶切吗

既然对照组条带出来了,应该不是PCR的问题,很有可能是没有阳性克隆。建议把载体片段重新酶切,再做一次,不放心的话可以把那几个克隆提质粒酶切验证。请参考:http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3069329
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3楼2011-04-16 09:20:49
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