24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1294  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

梦想起飞

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】抗性基因要表达,咋办? 已有3人参与

最近又遇到一个问题,请求大家帮助!
我需要四环素抗性基因,已经在pBR322质粒上找到了,但是只找到ORF,就是从ATG到TAA的这一段。但是我的目的是想要这段基因表达,那就还需要上游的启动子啊,SD序列,还有下游的终止子这些元件。不知道该怎么找到这些元件呢。我觉得应该是在ATG的上游多扩增一段序列,可是不知道到底要多长?还有下游终止子序列,在TAA之后多远的地方呢?这些应该怎么确定啊??极度迷茫中……
等待高手们解惑……
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦想起飞

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-04-15 21:40:25:
PBR322质粒的全序列应该都有了吧?在这个质粒上四环素抗性基因上可以表达的,所以它的启动子元件是完整的。一般启动子序列在起始密码子上游几十个bp,你若是担心就扩增一百多bp好了,够用了。对于终止元件就不用考 ...

谢谢你的解答!小木虫好温暖哦……
4楼2011-04-16 10:06:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

郝钊

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
西瓜(金币+4): 鼓励 2011-04-16 00:01:01
PBR322质粒的全序列应该都有了吧?在这个质粒上四环素抗性基因上可以表达的,所以它的启动子元件是完整的。一般启动子序列在起始密码子上游几十个bp,你若是担心就扩增一百多bp好了,够用了。对于终止元件就不用考虑了,在序列内部,转录会在终止密码子处结束,即使不结束,翻译的时候遇到终止密码子,翻译也会结束。
2楼2011-04-15 21:40:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
西瓜(金币+2): 热心的天使 2011-04-16 00:01:17
只需要有启动子就可以了。。。。正如楼上所说启动子在起始密码子上游几十BP处,你如果不放心可以往前面扩上100-200bp,完全可以的。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-04-15 23:04:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦想起飞

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-04-15 23:04:25:
只需要有启动子就可以了。。。。正如楼上所说启动子在起始密码子上游几十BP处,你如果不放心可以往前面扩上100-200bp,完全可以的。。。

谢谢你的解答!小木虫好温暖哦……
5楼2011-04-16 10:06:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研求调剂 +5 子木呐 2026-04-12 5/250 2026-04-12 22:15 by paopaotu326
[考研] 268分085602化学工程调剂 +30 月照花林。 2026-04-09 30/1500 2026-04-12 19:17 by laoshidan
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[硕博家园] 有没有学校材料专业收跨调(一志愿085410) +6 momo(上岸版) 2026-04-06 9/450 2026-04-11 22:38 by wj165256
[考研] 267求调剂 +8 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:42 by cfdbai
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 求调剂 +10 璃茉一定上岸 2026-04-10 10/500 2026-04-11 13:31 by 1005715100
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-06 10/500 2026-04-11 10:36 by 紫曦紫棋
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +9 天下ww 2026-04-09 9/450 2026-04-10 22:58 by Ftglcn90
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +20 慕绝cc 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 10:22 by xujun0624
[考研] 材料专硕调剂 +16 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 17/850 2026-04-09 21:16 by wutongshun
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 367求调剂 +10 hffQAQ 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:06 by lijunpoly
[考研] 332,085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +10 努力奋斗112 2026-04-07 10/500 2026-04-08 15:01 by screening
[考研] 化工学硕 285求调剂 +26 Wisjxn 2026-04-07 26/1300 2026-04-08 14:42 by screening
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 22408 318分求调剂 +4 勤奋的小笼包 2026-04-06 6/300 2026-04-07 15:05 by 纸鹤555
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
信息提示
请填处理意见