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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】抗性基因序列如何得到？
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】抗性基因序列如何得到？ 已有5人参与

小妹的实验中需要一段抗性基因，初步打算用四环素抗性基因，查找到pBR322质粒上有此段基因。可是怎么才能得到具体序列呢？不知道序列没法设计引物啊……
各位大侠帮帮忙啦！
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1楼 2011-01-07 17:46:54
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★
最爱花诗雨(金币+1):鼓励一下 2011-01-07 18:21:18
你直接将质粒上的Tc抗性基因切下来纯化一下不就完了！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-01-07 17:56:42
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2011-01-10 09:10:21
设计引物PCR也可以得到该基因。
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3楼2011-01-07 19:22:29
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duanming123

木虫 (正式写手)
摇菌测序啊
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4楼2011-01-07 19:44:19
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695

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议选用直接酶切或者修饰后的PCR产物酶切
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5楼2011-01-08 01:24:27
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-01-07 19:22:29:
设计引物PCR也可以得到该基因。

我正是要这么干，问题是根据什么设计引物啊？
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6楼2011-01-09 20:47:59
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by duanming123 at 2011-01-07 19:44:19:
摇菌测序啊

迷茫……具体是什么程序呢？多谢指教
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7楼2011-01-09 20:48:44
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 695 at 2011-01-08 01:24:27:
建议选用直接酶切或者修饰后的PCR产物酶切

用什么酶切呢？哪来的PCR产物呢？不好意思，小妹太浅薄了，难以领会。还望具体指点一下大致程序，谢谢啦！！！
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8楼2011-01-09 20:51:36
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):谢谢交流 2011-01-09 21:33:26
引用回帖:
Originally posted by 梦想起飞 at 2011-01-09 20:47:59:

我正是要这么干，问题是根据什么设计引物啊？

根据该基因的序列，NCBI或者图谱上能查到该基因序列的。
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2011-01-09 21:03:22
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