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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】抗性基因问题
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】抗性基因问题

请各位帮帮忙
     最近我的实验需要一段抗性基因，我准备从一般的载体上P一段出来，我准备用KAN的片段，请问我前面的启动子要多长，另外大家除了kan、AMP外还有其他比较适合实验的抗性基因吗？
     谢谢各位给予指导！
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1楼 2011-01-06 10:17:52
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susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★
dhd997(金币+2):good 2011-01-06 10:37:32
liuyuexinfei(金币+1): 2011-01-07 09:41:55
保险起见的话，将抗性基因上游序列全部一起扩增下来，也就几百bp，另外如果你有敲除系统里的那个pKD4的话，扩增FRT中间的部分，肯定错不了。
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2楼2011-01-06 10:33:42
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-01-06 10:33:42:
保险起见的话，将抗性基因上游序列全部一起扩增下来，也就几百bp，另外如果你有敲除系统里的那个pKD4的话，扩增FRT中间的部分，肯定错不了。

就是一般的卡钠抗性，从Pet-28a中P出来，请问上游序列多出300bp可以了吗？
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3楼2011-01-07 09:44:20
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susizheng

木虫 (著名写手)
liuyuexinfei(金币+1): 2011-01-07 11:26:05
引用回帖:
Originally posted by liuyuexinfei at 2011-01-07 09:44:20:


   就是一般的卡钠抗性，从Pet-28a中P出来，请问上游序列多出300bp可以了吗？

可以的，把抗性基因与上一个元件之间的序列同抗性基因一起扩下来。
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4楼2011-01-07 10:12:28
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-01-07 10:12:28:

可以的，把抗性基因与上一个元件之间的序列同抗性基因一起扩下来。

谢谢了，我试试看
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5楼2011-01-07 11:26:25
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