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chui2004铁杆木虫 (正式写手)
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[交流]
【求助/交流】大肠杆菌转化质粒，出来的不是我要的了，怎么回事？已有8人参与
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最近在做质粒构建的工作，当没有完成最终构建之前，质粒DNA转化大肠杆菌都很正常，而且很容易转化成功，但是将质粒构建成功后，转化大肠杆菌变得非常困难，而且DH5a转不进去;JM109，TOP10转入后，跑电泳比我的目的质粒小了，做双酶切检定，不是我要的质粒载体，这是怎么回事呢？ 我做的是一个重组酶的载体，原始载体是pBV220，将构建好的质粒转入BL21（DE3）感受态细胞中，在30°培养时，重组酶是否表达？原因是我在没诱导之前，质粒DNA已经发生了部分的重组。 |
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