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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】类囊体膜蛋白跑SDS-urea-PAGE的问题
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feitiannongying

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】类囊体膜蛋白跑SDS-urea-PAGE的问题

最近试验要做一个拟南芥类囊体膜蛋白的Western-Blot，看了好多文献说是跑SDS-urea-PAGE效果要好一些，我不知道原理是什么，我试着跑了两次效果不好主要问题：如果按照正常的SDS-PAGE配方佩15%的分离胶10ml含6M尿素，加尿素固体的话最后总的体积要大于10ml ，即便将配方中的水去掉直接加尿素固体，最后总体积仍然大于10ml，跑完染色后效果还不如正常的点用效果好。我想知道为什么做囊体膜蛋白的Western-Blot为什么要跑SDS-urea-PAGE配制电泳？如果跑SDS-urea-PAGE配制电泳尿素怎么处理，直接加固体还是配到Tris-HCl里面或者Arc-Bis里面？还望经验丰富的老师帮忙解答一下，万分感谢！！

[ Last edited by feitiannongying on 2011-4-9 at 18:58 ]
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1楼 2011-04-09 18:52:37
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