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【求助/交流】超薄切片中,植物亚细胞中的重金属固定问题
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打算做透射电子显微镜(TEM),观察植物亚细胞中重金属镉(Cd)的分布状态,看了一些相关文献,有以下几点困惑,希望得到大家的帮助: 1.Cd在植物亚细胞中会不会渗出? 2.文献讲用Na2S固定,这种方法可靠吗? 3.植物中已经存在重金属了,做TEM时还要再用柠檬酸铅之类的染色吗? 4.有谁实验室比较擅长做这方面的? 恳请帮助。 |
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xupeixian(金币+5):谢谢参与
xupeixian(金币+10): 2011-04-06 17:22:28
xupeixian(金币+5):谢谢参与
xupeixian(金币+10): 2011-04-06 17:22:28
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小虫做TEM,提供些参考意见,讲的不对的还请指教: 1、Cd在植物亚细胞中会不会渗出。植物组织是切成1~3mm³的小块,在进行超薄切片的时候还要修包埋块,一般都是看块中间的,lz只要在取样的时候小心些就是,不要切到感兴趣的部位。 2、Na2S固定我没用过。植物组织固定分前固定和后固定,前固定都是用2.5%的戊二醛,后固定用1%锇酸。当然也有其他的一些多重固定方法,视样品材料而定,lz可以去搜一下,很多的。 3、植物TEM必须要用柠檬酸铅和醋酸双氧铀双重的染色的,因为超薄切片太薄,在电镜下的反差弱,需要染色来加强反差。 祝lz实验成功! |
2楼2011-04-05 07:48:13
3楼2011-04-06 17:28:20
4楼2011-04-07 11:43:24
5楼2011-04-07 12:50:01
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