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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xupeixian

木虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】超薄切片中,植物亚细胞中的重金属固定问题

打算做透射电子显微镜(TEM),观察植物亚细胞中重金属镉(Cd)的分布状态,看了一些相关文献,有以下几点困惑,希望得到大家的帮助:
1.Cd在植物亚细胞中会不会渗出?
2.文献讲用Na2S固定,这种方法可靠吗?
3.植物中已经存在重金属了,做TEM时还要再用柠檬酸铅之类的染色吗?
4.有谁实验室比较擅长做这方面的?
恳请帮助。
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champion555

捐助贵宾 (正式写手)



xupeixian(金币+5):谢谢参与
xupeixian(金币+10): 2011-04-06 17:22:28
小虫做TEM,提供些参考意见,讲的不对的还请指教:
1、Cd在植物亚细胞中会不会渗出。植物组织是切成1~3mm³的小块,在进行超薄切片的时候还要修包埋块,一般都是看块中间的,lz只要在取样的时候小心些就是,不要切到感兴趣的部位。

2、Na2S固定我没用过。植物组织固定分前固定和后固定,前固定都是用2.5%的戊二醛,后固定用1%锇酸。当然也有其他的一些多重固定方法,视样品材料而定,lz可以去搜一下,很多的。

3、植物TEM必须要用柠檬酸铅和醋酸双氧铀双重的染色的,因为超薄切片太薄,在电镜下的反差弱,需要染色来加强反差。

祝lz实验成功!
2楼2011-04-05 07:48:13
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xupeixian

木虫 (小有名气)


首先,我要谢谢你,等待了这么多天,终于有回复的了。
      Na2S固定,主要是在戊二醛固定后,来使Cd离子沉淀用的,生成CdS颗粒,在TEM中就会观察到黑色颗粒。但是这种方法是否可靠,不得而知。因为饿酸后固定后,细胞中的脂肪粒等等会形成黑色的颗粒吗?到底哪些黑色颗粒是重金属呢?这个有点疑问。
3楼2011-04-06 17:28:20
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champion555

捐助贵宾 (正式写手)



xupeixian(金币+5):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by xupeixian at 2011-04-06 17:28:20:
首先,我要谢谢你,等待了这么多天,终于有回复的了。
      Na2S固定,主要是在戊二醛固定后,来使Cd离子沉淀用的,生成CdS颗粒,在TEM中就会观察到黑色颗粒。但是这种方法是否可靠,不得而知。因为饿酸后固定后 ...

呵呵,最近没怎么上小木虫,所以到现在才看到。

你可以试一试这个方法。切片中的黑色颗粒是肯定存在的。我建议CdS颗粒在片子上的粒径大小要搞清楚,这样即使片子上有些污染了也可以根据CdS的粒径来分析。
还有就是铀-铅染色的时候要小心一点,不能有铅污染。
4楼2011-04-07 11:43:24
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xupeixian

木虫 (小有名气)


好的,谢谢你的中肯建议。
5楼2011-04-07 12:50:01
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chess2011

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by xupeixian at 2011-04-06 17:28:20
首先,我要谢谢你,等待了这么多天,终于有回复的了。
      Na2S固定,主要是在戊二醛固定后,来使Cd离子沉淀用的,生成CdS颗粒,在TEM中就会观察到黑色颗粒。但是这种方法是否可靠,不得而知。因为饿酸后固定后, ...

不知这位朋友能否把戊二醛和CdS沉降的文献发给我下
6楼2013-06-09 15:02:53
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Liz.Li

新虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by champion555 at 2011-04-05 07:48:13
小虫做TEM,提供些参考意见,讲的不对的还请指教:
1、Cd在植物亚细胞中会不会渗出。植物组织是切成1~3mm³的小块,在进行超薄切片的时候还要修包埋块,一般都是看块中间的,lz只要在取样的时候小心些就是,不 ...

请问做植物材料的透射电镜观察对电镜型号有要求吗?您用的是什么型号的透射电镜呢?
我们学校的透射电镜是日本电子JEM-2100,但是负责的老师跟我说他们都做无机材料的,植物材料怕是不能看……
7楼2014-01-05 10:58:05
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霍格兰

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by champion555 at 2011-04-05 07:48:13
小虫做TEM,提供些参考意见,讲的不对的还请指教:
1、Cd在植物亚细胞中会不会渗出。植物组织是切成1~3mm³的小块,在进行超薄切片的时候还要修包埋块,一般都是看块中间的,lz只要在取样的时候小心些就是 ...

如果用普通的电子显微镜,看植物组织中重金属的分布状态用什么染色呢

发自小木虫IOS客户端
8楼2017-11-23 00:48:43
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