24小时热门版块排行榜    

查看: 2513  |  回复: 24
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tangchaoxi

新虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】酶连转化

我将载体和片段分别用同样的两个酶双酶切后酶连,转化子提质粒酶切验证,结果只有一个条带,大概载体那么大,怀疑是不是载体自连了?如果是的话,我如何避免载体自连,把我的目的片段连上去呢?请各位帮帮忙…
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tangchaoxi at 2011-03-25 21:48:25:
非常感谢,这倒提醒我了。我是跟别人拿的质粒转到大肠杆菌,再提出来以备后用,当时提出来检测结果是一条带,别人的是三条带。因为这个载体有抗性,所以当时觉得转化子肯定没问题。质粒非得有三条带吗?

质粒也不都是三条带,但是酶切后肯定质粒,应该与原来的质粒电泳图不一样
20楼2011-03-28 09:55:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)


tangchaoxi(金币+1): 2011-03-24 15:32:38
载体酶切后加CIP处理
2楼2011-03-24 11:59:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)


对连接产物筛选,一般不是都有一些抗性基因连接后表达之类的,
3楼2011-03-24 12:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whyann

银虫 (初入文坛)


tangchaoxi(金币+2): 2011-03-24 15:30:25
既然是双酶切,产生的应该是不同的粘性末端,怎么会自连,应该是其他问题,楼主好好回忆每步
4楼2011-03-24 13:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 295求调剂。一志愿报考郑州大学化学工艺学硕,总分295分 +4 yl1 2026-03-02 4/200 2026-03-02 14:36 by a不易
[考研] 272求调剂 +7 材紫有化 2026-02-28 7/350 2026-03-02 12:48 by 无际的草原
[考研] 275求调剂 +4 明远求学 2026-03-01 4/200 2026-03-02 12:45 by 无际的草原
[考研] 276求调剂 +4 路lyh123 2026-02-28 5/250 2026-03-02 11:20 by yuchj
[考研] 材料学硕318求调剂 +14 February_Feb 2026-03-01 16/800 2026-03-02 11:17 by yuchj
[考研] 材料工程专硕283求调剂 5+4 ,!? 2026-03-02 6/300 2026-03-02 11:07 by 黑!在干嘛
[考研] 求调剂 +8 yunziaaaaa 2026-03-01 9/450 2026-03-02 11:03 by 黑!在干嘛
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +6 wsl111 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:00 by ydudjddnd
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +5 pin8023 2026-02-28 7/350 2026-03-02 10:33 by ZY,先生
[考研] 275求调剂 +3 L-xin? 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:22 by 热情沙漠
[考研] 0854复试调剂 276 +4 wmm9 2026-03-01 6/300 2026-03-02 09:28 by 热情沙漠
[考研] 材料工程269求调剂 +3 白刺玫 2026-03-02 3/150 2026-03-02 09:25 by 一休哥FU
[考研] 322求调剂 +3 熊境喆 2026-03-01 3/150 2026-03-02 08:44 by houyaoxu
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
信息提示
请填处理意见