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【求助/交流】酶连转化
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tangchaoxi
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[交流]
【求助/交流】酶连转化
我将载体和片段分别用同样的两个酶双酶切后酶连,转化子提质粒酶切验证,结果只有一个条带,大概载体那么大,怀疑是不是载体自连了?如果是的话,我如何避免载体自连,把我的目的片段连上去呢?请各位帮帮忙…
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2011-03-24 11:13:38
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tangchaoxi
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引用回帖:
Originally posted by
rioarsenal
at 2011-03-25 10:27:14:
是啊,建议你酶切后,做个电泳看看是否切开
没有办法检测的,切下的片段很小
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16楼
2011-03-25 11:38:18
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gongeleven
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tangchaoxi(金币+1): 2011-03-24 15:32:38
载体酶切后加CIP处理
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2楼
2011-03-24 11:59:39
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wqj1988926
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虫号: 1156883
对连接产物筛选,一般不是都有一些抗性基因连接后表达之类的,
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3楼
2011-03-24 12:55:58
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whyann
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tangchaoxi(金币+2): 2011-03-24 15:30:25
既然是双酶切,产生的应该是不同的粘性末端,怎么会自连,应该是其他问题,楼主好好回忆每步
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4楼
2011-03-24 13:13:53
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