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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告

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xjj5287

铁虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】cloning 已有3人参与

insert 1.1KB, vector 3.6kb, one step后，用XbaI 酶切后,有一个SIZE在4.8KB左右，这个足以说明LIGATION成功了吗？

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1楼 2011-03-21 15:16:32

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地图蜗牛

银虫 (小有名气)

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连接完了就切了？好多人一般都不在这一步验证吧。一般就连接产物转化，菌落PCR，阳性克隆摇菌，提了质粒再酶切验证，然后送测序。

[ Last edited by 地图蜗牛 on 2011-3-22 at 11:39 ]

5楼2011-03-22 11:34:17

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查看全部 6 个回答

我爱罗

木虫 (小有名气)

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★
小木虫(沙发+1，金币+0.5):恭喜抢个沙发，再给个红包

你的insert还能从vector上再切下来么？

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花褪残红青杏小，燕子飞时绿水人家绕

2楼2011-03-21 16:31:32

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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

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★
小木虫(金币+0.2):抢了个小板凳，给个红包

应该连接上了。你最好是再加一个未酶切质粒对照。建议你最好把质粒酶切成多个片段检测。

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hehe

3楼2011-03-21 17:19:24

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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

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专业: 微生物遗传育种学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

应该连接上了，不放心可以用双酶切试试，在载体上选择一个，在外源片段上选择一个，一切即可变分晓，呵呵，，，，

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一品黄山

4楼2011-03-21 22:52:34

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