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【求助/交流】使用TaKaRa LA PCR in vitro Cloning Kit试剂盒克隆启动子的问题 已有1人参与
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使用TaKaRa LA PCR in vitro Cloning Kit试剂盒克隆启动子时，遇到了很严重的自扩现象，一轮弥散，二轮出现的条带全部为C2或S2单引物对照自扩条带，这是什么原因造成的呢？如何解决该问题？谢谢！ （问题转自百度知道） 我自己也用这个试剂盒做了很久，遇到同样问题，PCR条件摸索了很多遍。最后没辙，直接拿弥散带连接，转化，测序。发现克隆到的序列2边引物都是C2（C2是对应的接头序列而设计的引物，Kit自带）。也就是说，PCR的条带是单引物P出来的。 打算试试巢扩。可还是很不确定。 如果有用过这个试剂盒的最好啦。因为按照试剂盒里的说明，理论上很难出现自扩现象的。 |
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2楼2010-11-21 09:40:56
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