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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请推荐比较好的感受态，或者自己做出比较好感受态的protocol
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alexguo221

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】请推荐比较好的感受态，或者自己做出比较好感受态的protocol 已有5人参与

最近在做cloning，转化之后，板上一直长不出东西来很奇怪。
老板说应该是感受态的问题。因为我们用一直以前都能做出来效果比较好的质粒作为对照，也长不出。
请问你们都用什么公司的感受态，比较好的。
还有能提供什么比较好的方法自己做感受态吗

非常感谢
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世道再难，也要呼吸顺畅。
1楼 2010-12-21 15:55:20
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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amisking(金币+2):鼓励发帖交流！ 2010-12-21 20:32:06
我是懒人，一直都用 TSS法制备感受态，很不错。做点突变、克隆等试验绰绰有余。点突变都长的满板子都是，半个月做了10多个点突。

这种方法的优点是稳定，谁都能做到6次到7次。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-12-21 16:51:37
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alexguo221

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-21 16:51:37:
我是懒人，一直都用 TSS法制备感受态，很不错。做点突变、克隆等试验绰绰有余。点突变都长的满板子都是，半个月做了10多个点突。

这种方法的优点是稳定，谁都能做到6次到7次。

根据的经验是传统的氯化钙法比较好，还是TSS做出来的比较好呢
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世道再难，也要呼吸顺畅。
3楼2010-12-21 18:42:32
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
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amisking(金币+1):鼓励发帖交流！ 2010-12-21 20:32:13
我们实验室做克隆做得不多，所以懒得自己做感受态
都是买国产的，挺好用的其实，100ul我们每次都分成两份来用
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4楼2010-12-21 19:01:14
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

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amisking(金币+2):good！ 2010-12-21 20:32:18
可以买现成的感受态回来用

一直是用氯化钙法做的感受态，效果也是很好
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
5楼2010-12-21 19:03:21
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Michael008

新虫 (初入文坛)
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amisking(金币+4):鼓励新虫发帖交流。 2010-12-21 20:32:25
买的感受态效果应该都还行吧,平均十来块一只，能省时间就好，不是吗?我们也是克隆做不很多，一直买天根的。

自己做的话分子克隆和coldspringharbor protocols上都有很多。效率高的一般操作就会麻烦一点。氯化钙法没觉得效率高，就是操作简单，需要的试剂也有限。

楼上说的TSS法，如果试剂方便凑齐就试试，我感觉是个方法就比基础的氯化钙法强
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6楼2010-12-21 20:11:46
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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引用回帖:
Originally posted by alexguo221 at 2010-12-21 18:42:32:

根据的经验是传统的氯化钙法比较好，还是TSS做出来的比较好呢

氯化钙做好了可以到10的8次的样子，但是不同的人和不同的批次可能差异很大。

但是TSS的做出来很稳定，差也能到6次，好的话也能到8次，平平常常都能做到7次，所以我都用TSS法做。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
7楼2010-12-21 21:28:45
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