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【求助/交流】cloning
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xjj5287
铁虫
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专业: 生物大分子结构与功能
[交流]
【求助/交流】cloning
已有3人参与
insert 1.1KB, vector 3.6kb, one step后,用XbaI 酶切后,有一个SIZE在4.8KB左右,这个足以说明LIGATION成功了吗?
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1楼
2011-03-21 15:16:32
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我爱罗
木虫
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小木虫(沙发+1,金币
+0.5
):恭喜抢个沙发,再给个红包
你的insert还能从vector上再切下来么?
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花褪残红青杏小,燕子飞时绿水人家绕
2楼
2011-03-21 16:31:32
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lvbobo823
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专业: 植物遗传学
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小木虫(金币
+0.2
):抢了个小板凳,给个红包
应该连接上了。你最好是再加一个未酶切质粒对照。建议你最好把质粒酶切成多个片段检测。
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hehe
3楼
2011-03-21 17:19:24
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ls2046
铁杆木虫
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专业: 微生物遗传育种学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
应该连接上了,不放心可以用双酶切试试,在载体上选择一个,在外源片段上选择一个,一切即可变分晓,呵呵,,,,
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一品黄山
4楼
2011-03-21 22:52:34
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地图蜗牛
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专业: 人类遗传学
连接完了就切了?好多人一般都不在这一步验证吧。一般就连接产物转化,菌落PCR,阳性克隆摇菌,提了质粒再酶切验证,然后送测序。
[
Last edited by 地图蜗牛 on 2011-3-22 at 11:39
]
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5楼
2011-03-22 11:34:17
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vs570588
木虫
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注册: 2009-08-04
性别: GG
专业: 环境工程
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
在连接后酶切验证的可行性有多大?准确吗
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6楼
2011-03-22 15:57:27
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