24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1094  |  回复: 4

疯花血月

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求助同源重组 已有2人参与

现在在利用同源重组做细菌的缺失,
但是发现第一次单交换后,设计多重PCR检测单交换,发现在上游和下游都发生了单交换,推断基因组整合了2个改造的质粒。那这样会不会在第二次单交换的时候回复突变的概率更大呢?
请大家指点下
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-03-17 13:58:13
建议重新筛选单交换株多重的解释不清楚的~~~

回复突变,要看你的同源重组指导序列的构成了。如果仅仅是缺失,而不是缺失加插入一段别的序列,回复突变的概率还是蛮高的。多挑几个,批量PCR吧~~~
小木虫之有关部门负责人
2楼2011-03-17 09:10:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯花血月

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by scelab at 2011-03-17 09:10:01:
建议重新筛选单交换株多重的解释不清楚的~~~

回复突变,要看你的同源重组指导序列的构成了。如果仅仅是缺失,而不是缺失加插入一段别的序列,回复突变的概率还是蛮高的。多挑几个,批量PCR吧~~~

郁闷的是,我当时筛选了63个单交换株,结果全都是上下游都能检测到。但是有点我不明白的是,假如如我所说是基因组在2个位点整合了2个质粒,那我的PCR检测图的上下游产物条带亮度应该一样才是。可我的总是下游亮一些。
3楼2011-03-17 09:41:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 疯花血月 at 2011-03-17 09:41:57:
郁闷的是,我当时筛选了63个单交换株,结果全都是上下游都能检测到。但是有点我不明白的是,假如如我所说是基因组在2个位点整合了2个质粒,那我的PCR检测图的上下游产物条带亮度应该一样才是。可我的总是下游亮 ...

无图无真相

把你缺失的片段以及所用引物做个结构图吧~~~帮你把把关
小木虫之有关部门负责人
4楼2011-03-17 09:50:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯花血月

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by scelab at 2011-03-17 09:50:19:
无图无真相

把你缺失的片段以及所用引物做个结构图吧~~~帮你把把关

另外一个引物在我们所构建质粒上,差不多在下游片段50bp位置,



5楼2011-03-31 15:03:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 疯花血月 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +8 hualkop 2026-04-11 8/400 2026-04-12 22:24 by fqwang
[考研] 考研求调剂 +5 子木呐 2026-04-12 5/250 2026-04-12 22:15 by paopaotu326
[考研] 272分材料子求调剂 +40 Loy0361 2026-04-10 52/2600 2026-04-12 19:23 by laoshidan
[考研] 一志愿2110,化学学硕310分,本科重点双非求调剂 +19 努力奋斗112 2026-04-08 19/950 2026-04-12 17:01 by lhj2009
[考研] 求助调剂,跨调 +12 X十甫寸Y 2026-04-11 12/600 2026-04-12 10:20 by zhouyuwinner
[考研] 调剂 +10 月@163.com 2026-04-11 10/500 2026-04-12 09:14 by zhouyuwinner
[考研] 人工智能320调剂08工类还有机会吗 +12 振—TZ 2026-04-10 12/600 2026-04-12 07:54 by wj165256
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[考研] 材料与化工300求调剂 +39 肖开文 2026-04-09 43/2150 2026-04-12 01:30 by 秋豆菜芽
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线,员工过不下去啦 +4 qut2026 2026-04-09 9/450 2026-04-12 00:54 by qut2026
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+14 化工人999 2026-04-09 48/2400 2026-04-11 10:27 by 89436494
[考研] 生物学调剂 +8 小冉要努力 2026-04-10 9/450 2026-04-11 10:22 by wwj2530616
[考研] 机械专硕270求调剂,接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 复试调剂,一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 1U盾记得记得就 +9 sanjin020722 2026-04-08 10/500 2026-04-09 14:11 by 诗与自由
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +11 emokidd 2026-04-08 12/600 2026-04-09 09:24 by wyf236
[考研] 327求调剂 +12 Xxjc1107. 2026-04-06 12/600 2026-04-08 16:46 by luoyongfeng
[考研] 259求调剂 +5 就爱吃土豆呀呀 2026-04-07 5/250 2026-04-07 22:40 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
信息提示
请填处理意见