应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】分类鉴定的时候，为什么pcr之后还要做TA克隆，转化，然后将序列测序呢？
51/1返回列表
查看: 3037  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

kaludefeiyu

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】分类鉴定的时候，为什么pcr之后还要做TA克隆，转化，然后将序列测序呢？

在做菌株分类鉴定的时候，为什么对菌株提了DNA，pcr之后还进行TA克隆，转化，然后将阳性克隆进行PCR之后再去测序呢？这样的好处是什么呢？希望大家知道的多多指教啊，非常感谢啊！！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-16 14:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaludefeiyu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by roomofxw at 2011-03-16 15:03:37:
为了测序准确：
1. PCR产物是混合物，所以要连在载体上，挑单克隆测序。
2.测序结果两端有几十bp是测不准的，所有连在载体上，用载体上的测序引物，可以把目的基因置于可信区。
3.实验结果方便保存

想问一下，怎么就能确定连在载体上的就是我们所需要的那个片段呢啊，它只能连16SRDNA,不可以连上引物吗？还有我们一般选用什么样的载体啊，
赞一下 回复此楼
3楼2011-03-17 10:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

roomofxw

木虫 (正式写手)
kaludefeiyu(金币+1): 说的清楚，明白了，谢谢 2011-03-17 09:14:22
kaludefeiyu(金币+1): 2011-03-17 09:17:38
为了测序准确：
1. PCR产物是混合物，所以要连在载体上，挑单克隆测序。
2.测序结果两端有几十bp是测不准的，所有连在载体上，用载体上的测序引物，可以把目的基因置于可信区。
3.实验结果方便保存
赞一下 回复此楼
2楼2011-03-16 15:03:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

roomofxw

木虫 (正式写手)
kaludefeiyu(金币+3): 谢谢 2011-06-01 15:15:08
引用回帖:
Originally posted by kaludefeiyu at 2011-03-17 10:06:13:
想问一下，怎么就能确定连在载体上的就是我们所需要的那个片段呢啊，它只能连16SRDNA,不可以连上引物吗？还有我们一般选用什么样的载体啊，

连到T载体上以后，蓝白斑筛选，阳性克隆提质粒做酶切鉴定或者菌落PCR，然后送测序。具体一点参见T vector说明书
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-17 10:46:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenxiang29

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
682350楼: Originally posted by roomofxw at 2011-03-16 15:03:37
为了测序准确：
1. PCR产物是混合物，所以要连在载体上，挑单克隆测序。
2.测序结果两端有几十bp是测不准的，所有连在载体上，用载体上的测序引物，可以把目的基因置于可信区。
3.实验结果方便保存

请问不可以直接连接到表达质粒上吗，然后测序
赞一下 回复此楼
5楼2012-11-01 09:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +6 yexuqing 2026-04-19 7/350 2026-04-23 12:32 by yexuqing
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +18 花田半亩～白 2026-04-21 18/900 2026-04-23 11:31 by 12021227
[考研] 有没有学校收留 +3 蒋昌鹏qtj 2026-04-20 3/150 2026-04-22 20:25 by 学员JpLReM
[考研] 312求调剂 +3 山河似你温柔 2026-04-22 3/150 2026-04-22 20:17 by 学员JpLReM
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 5/250 2026-04-22 10:42 by xq83
[论文投稿] 急需审稿人！！！ +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 8/400 2026-04-21 16:26 by 啃面包的小书虫
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭