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yangxicshe

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助】出峰时间提前至5分钟左右?不知道是怎么造成?? 已有1人参与

新药分析 梯度洗脱出峰时间提前至5分钟左右出峰

各位前辈,我最近接到一项新的实验,委托方提供的方法是甲醇:水=10:90,我们的液相色谱是反向色谱,C18柱 250mm*5mm  4.6um。由于该方法出峰时间长,理论塔板数低(三千八至四千左右),我将其方法换为乙腈,梯度洗脱(10%-30%-10%:0min-8min-12min-15min stop),出峰时间提前至5分钟左右,TP一万多,但是出峰前会上升类似于漂移,但出峰完基线在十分钟左右才开始正常漂移,峰不拖尾。请教大家如何解决?由于是新药,我们不知道其化学结构。
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痴夷子皮

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老痞

优秀版主优秀版主

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 谢谢指教! 2011-03-14 21:19:32
甲醇:水=10:90
甲醇换乙腈,梯度洗脱(10%-30%-10%:0min-8min-12min-15min stop)
首先,甲醇极性比乙腈大,改用乙腈后,流动相极性减少,保留时间略提前;
其次,梯度10%-30%,0min-8min,随有机相增大流动相极性较少,保留时间提前。

走梯度,流动相比例变化较剧烈的时候,基线会略有上漂。可以试试适当调低8min时乙腈比例,或调长乙腈达30%时所需时间。
守候在风中的宁静。
2楼2011-03-14 18:27:00
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